Məlumat

Antikorlar soyuducuda deyil, dondurucuda saxlanılır

Antikorlar soyuducuda deyil, dondurucuda saxlanılır


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Laboratoriyamdan kimsə soyuducu yerinə antikor qutusunu dondurucuya qoydu. Mən ümid edə bilərəm ki, onlar hələ də işləyəcəklər?


IgG-lərin əksəriyyəti dondurucuda saxlandıqda yaxşı olmalıdır.

Kiçik hissələrdə -20 və ya -80 dərəcəsində dondurulması optimal saxlama şəraitidir. Ali-sitat dondurma və ərimə nəticəsində zərəri minimuma endirir, həmçinin bir flakondan bir neçə dəfə pipetləmə ilə daxil olan çirklənmə. Alikotlar bir dəfə dondurulmalı və əridilməlidir, qalanları 4 dərəcə C-də saxlanılmalıdır.

Fermentlə birləşmiş antikorlar ümumiyyətlə dondurulmamalı və bunun əvəzinə 4 dərəcə C-də saxlanmalıdır. Dondurma və ərimə antikor bağlama qabiliyyətinə təsir etməklə yanaşı, fermentativ aktivliyi azaldar.

IgG3 izotipinin antikorları ərimə zamanı aqreqatlar əmələ gətirmək meylinə görə unikaldır və həmişə 4 dərəcə C temperaturda saxlanılmalıdır.

Şəxsən mən istifadə etdiyim antikorları -20-də saxlayıram (onlar PBS-dədir) və onlar ilk dondurma ərimə dövrü üçün yaxşı işləyirlər. Mən heç vaxt birdən çox dondurulmuş əriməni sınamamışam, buna görə şərh verə bilmərəm.

http://www.abcam.com/ps/pdf/protocols/antibody_storage.pdf


Siz dondurucunun hansı temperaturdan danışdığınızı göstərmirsiniz. Antikor uzun müddət -80 temperaturda saxlanıla bilər, lakin donma və ərimə prosesindən qaçınmaq lazımdır. Bəzi insanlar antikorun alikotu -80-də saxlayırlar. Başqa bir yol, antikoru Gliserolda sulandırmaq, 50% seyreltmə etməkdir. Yaxşı qarışdırmaq lazımdır, sonra -20-də saxlamaq lazımdır.


Partlayıcı materialların soyudulması zamanı ehtiyat tədbirləri görülməlidir. Partlayışa davamlı soyuducular qurğunun daxilində və ya xaricində partlayışın baş verməsinin qarşısını almaq üçün tikilir. Termostat və kompressor komponentləri izolyasiya edilib və qurğunun özü qığılcımların qarşısını almaq üçün bərk naqillə (fişsiz) olub.

Qan və qan komponentlərini saxlamaq üçün istifadə edilən soyuducular AABB, Amerika Milli Qırmızı Xaç (ANRC) və ABŞ Qida və Dərman Administrasiyasının (FDA) tələblərinə cavab verməlidir. Bunlara daxildir:

  • Temperaturun vahidliyini qorumaq üçün məcburi hava dövranı
  • Açıldıqdan sonra temperaturun sürətli bərpası üçün istiqamətli hava axını
  • Temperatur 1° ilə 8°C arasında tənzimlənir
  • Yüksək və aşağı temperatur, elektrik kəsilməsi üçün vizual və səsli siqnallar
  • Batareya ehtiyat sistemi

Nə üçün COVID-19 üçün iki yeni peyvənd antikor əvəzinə mRNA-lıdır?

Hazırlanma mərhələsində olan yüzlərlə COVID19 peyvəndi və klinik sınaqlarda olan onlarla peyvənd mRNT-dən rekombinant viruslara, subunit zülallardan təsirsiz hala gətirilən viruslara qədər hər cür müxtəlif yanaşmalardan istifadə edir.

mRNT peyvəndlərinin əsas üstünlüyü onların çox tez hazırlana bilməsidir. Buna görə də bu mərhələyə çatan ilk iki peyvənd mRNT-dir - onlar ən sürətli inkişaf edənlərdir.

Bu, onların ən immunogen və ya daha təsirli və ya buna bənzər bir şey olacağı demək deyil. Məhz təbiətlərinə görə, onlar heç bir şeydən hazır, təsdiqlənmiş və sınaqdan keçirilmiş məhsula keçmək üçün sürətlidirlər.

Növbəti bir neçə həftə və aylarda biz daha ənənəvi və istehsalı və yayılması daha asan olan peyvəndlər də daxil olmaqla, müxtəlif digər peyvənd növləri üçün hesabatları görməyə başlamalıyıq. Bu peyvəndlərdən bəzilərinin mRNT peyvəndləri kimi təsirli olduğu ortaya çıxarsa, çox güman ki, istifadə rahatlığı səbəbindən daha geniş istifadə olunacaq.


Koronavirusun Potensial Müalicəsi Bir Elmin Dondurucusunda Necə Yarandı

1998-ci ildə hollandiyalı alim Berend Boş koronavirusların tədqiqini həyatının işinə çevirmək qərarına gəldikdə, onların tibb tədqiqatçıları arasında topladığı diqqət o dərəcədə idi ki, Ph.D. qatıldığı proqram baytarlıq elmləri şöbəsində idi. Ağır infeksiyalara səbəb ola bilən koronaviruslar heyvanlar arasında yayılırdı, lakin insanların yoluxduğu növlər nadir hallarda soyuqdəymədən daha pis bir şeyə səbəb olur. "İnsan sağlamlığı üçün bu o qədər də vacib deyildi" dedi Bosch.

Bu, Utrext Universitetində doktoranturasını bitirdiyi vaxt ətrafında dəyişməyə başladı. 2002 və 2003-cü illərdə SARS, yarasalardan insanlara sıçrayan bir koronavirusun yaratdığı xəstəlik geniş çaxnaşma yaratdı və səkkiz yüzə yaxın insanın ölümünə səbəb oldu. Bosch bunun üçün potensial müalicələr üzərində işləməyə başladı. Bir neçə ay ərzində o və həmkarları elmi dünyanın nəzərlərini onların üzərində hiss etdilər - o, bir neçə konfransda patogen haqqında danışmağa dəvət edildi - lakin epidemiyanın qarşısını alandan sonra maraq azaldı. Laboratoriya həyatı həftə sonları aşağı təzyiqli idi, o, qayıq icarəyə götürməyi və yelkənlə gəzməyi xoşlayırdı.

2012-ci ildə, baxmayaraq ki, diqqət yeni bir artım oldu MERS, bir koronavirusun yaratdığı başqa bir xəstəlik, əsasən Ərəbistan yarımadasında təxminən doqquz yüz insanın ölümünə səbəb oldu. The MERS epidemiya Bosch və digər elm adamları üçün vacib bir dərs oldu: növ atlaya bilən koronaviruslar bəzilərinin güman etdiyi kimi əsrdə bir dəfə baş verən bir şey deyildi. Artıq on ildə iki dəfə bir şey olduqlarını sübut etdilər. İndi Utrextdəki fakültədə çalışan Bosch, xəstəliklə mübarizədə vəd verən antikorları müəyyən etməyə çalışdı. Antikorlar, bəzi ağ qan hüceyrələrinin yad bir maddəyə, bir antigenə cavab olaraq hazırladığı Y formalı zülallardır və bədənimizin infeksiyaya qarşı mübarizəsinin vacib hissəsidir. Virus hissəciyinin və ya virionun bir hissəsinə bağlanaraq viruslara qarşı səfərbər olurlar. Bəzi antikorlar, bədənin immunitet sisteminin digər komponentləri tərəfindən hücuma çağıran mayak kimi hərəkət edir. Digərləri virusu birbaşa zərərsizləşdirir, hüceyrələrə nüfuz etməsinin qarşısını alır.

Bütün koronaviruslar zülalla örtülüdür və MERS, SARS, və "ümumi soyuqdəymə" tipli koronavirus bu zülalların müəyyən hissələrini bölüşür. Boschun fikrincə, geniş reaktiv antikor "bəlkə də növbəti pandemiyaya qarşı bizə kömək edə bilər". O, insan tipli antikorlarla antigenlərə cavab verməsi üçün genetik olaraq hazırlanmış siçanlar ilə başladı və siçanlara insan yoluxduran koronaviruslarda görünən bir protein verdi. Bir neçə həftə və ya bir qədər sonra, onun komandası siçanlardan antikor istehsal edən hüceyrələr çıxardı və virus bağlayan antikorları təcrid etdi. Bosch və həmkarları bu antikor kolleksiyasından əlli bir antikor təyin etdilər. SARS, və bir çox koronavirusa qarşı "geniş reaktiv" olan bir neçəsi. "Onların dərhal faydası olmadı" dedi, amma "mən əşyaları atmağı sevmirəm" dedi. Bosch komandası uzun oyun oynayırdı: nümunələri dondurucuya qoydular və gözlədilər.

Bu gün, COVİD-19 xəstə dəstəkləndiyi qədər müalicə edilmir: ağır hallarda onlara antiinflamatuarlar - adətən steroidlər verilir və ventilyatorlar taxılır ki, virusa qədər davam edə bilsinlər. SARS-CoV-2, immunitet sisteminə tab gətirir və ya əksinə. Bir çox tədqiqatçının tapmağa çalışdığı şey ilk növbədə infeksiyanın yaranmasının qarşısını almaqdır. Burada üç hücum rejimi var.

Ən qiymətli silah təbii ki, peyvənddir. Effektiv olanın bol tədarükü pandemiyanın sona çatmasına səbəb ola bilər və çoxlu namizədlər inkişaf mərhələsindədir. Yenə də hamı peyvəndlərə yaxşı reaksiya vermir, xüsusən də xəstəlikdən daha çox risk altında olan yaşlılar və immuniteti zəif olanlar. Bəzi insanlar, məsələn, çox kiçik uşaqlar, ümumiyyətlə peyvənd ala bilməyəcəklər. Təhlükəsizliyi və effektivliyi haqqında təsadüfi, nəzarət edilən sınaqların nə deməsindən asılı olmayaraq, digər insanlar jabdan imtina edəcəklər. Həmçinin, peyvəndlərin təsirli olması bir neçə həftə çəkir, ona görə də yeni yoluxmuş olsanız, yəqin ki, sizə kömək etməyəcək. Və çox güman ki, hər hansı bir peyvəndin kifayət qədər ehtiyatını istehsal etmək və onu milyardlarla insana çatdırmaq üçün illər və əhəmiyyətli infrastruktur tələb olunacaq.

Başqa bir yanaşma, effektiv antiviral dərman hazırlamaqdır - bakterial infeksiyalar üçün antibiotiklər təyin etdiyimiz adi şəkildə virus infeksiyası üçün təyin edə biləcəyimiz bir şey. İndiyə qədər geniş spektrli bir virus əleyhinə vasitə çətin idi və hazırda yeni koronavirusa qarşı sınaqdan keçirilən daha dar hədəfli antivirallar təvazökar dərəcədə təsirli görünür. Gilead-ın remdesiviri çox diqqət çəkdi, lakin bərpa müddətini cəmi bir neçə günə sürətləndirir və yalnız bəzilərində COVİD-19 xəstə.

Bu, Bosch-un yaxşı yığılmış dondurucusu ilə bankçılıqda istifadə etdiyi müalicə növündən geri qalır: antikor dərmanı. Düzgün növ antikorlarla təmin olunarsa, demək olar ki, virusa qarşı artıq peyvənd olunmuş kimi mübarizə apara bilərsiniz. Antikor dərmanları, məruz qalma riski yüksək olan və ya ciddi xəstəlik riski yüksək olan tibb işçiləri və digərləri üçün həyat və iş xilasedici profilaktika ola bilər. var məruz. Bu dərmanlar peyvəndlərin bədəni öz antikorları istehsal etməyə təhrik etmədiyi uzunmüddətli potensiala malik deyil və onlar davamlı olaraq qan dövranını tərk edirlər - bir atış bir ay belə davam edə bilməz. Antikor dərmanları peyvəndlər qədər uzunmüddətli olmasa da, onlar daha tez əldə edilə bilər - vacib bir dayandırma tədbiri.

Bosch, qırx beş yaşında, çevik, niyyətli və təbiətdən kənar oğlandır, virusologiyanın bir Tintinidir. O, Şimal dənizi yaxınlığında Hollandiyada böyüdü və atası Royal Dutch Shell-də kimyaçı kimi iş üçün tez-tez səyahət etdi və anası dörd bacısını izləməklə məşğul olduğu üçün sahildəki qum təpələri ilə gəzmək üçün geniş sərbəstliyə sahib idi. iti, sahil quşlarına baxır. O, hələ də bir az küləkli, dağınıq sarı saçlı, hətta evdə belə görünür. Wageningen Universitetindən mikrobiologiya dərəcəsi ilə təchiz olunmuş Utrextə ilk gəldiyində, o, koronavirusların necə işlədiyini öyrəndi və bu, virusun əsas xüsusiyyəti olan sünbül zülalına heyran oldu.

Koronavirus bu zülallarla örtülmüşdür - buna görə də onun "korona" görünüşü var. Zülallara yapışaraq, bu antikorlar virusun hüceyrələrə daxil olmasının, çoxalmasının və tam bir infeksiya yaratmasının qarşısını ala bilər. Bosch komandası ilə birlikdə dünyanın başqa yerlərindəki müxtəlif biotexnologiya firmalarının tədqiqatçıları antikorların klonlanmasında ümidverici erkən nəticələr göstəriblər. SARS-CoV-2.

Anticisimlərin qoruyucu xüsusiyyətlərinin kəşfi 1890-cı ilə təsadüf edir, o zaman Berlindəki həkimlər difteriya və ya tetanozla yoluxmuş heyvandan qan zərdabının verilməsinin başqa bir heyvanı eyni xəstəliyə qarşı immunitetli edə biləcəyini göstərdilər. İnsanlarda konvalesent plazma adlanan müxtəlif virus xəstəlikləri üçün istifadə edilmişdir. Lakin zərdab müalicəsi fəsadlara səbəb ola bilər - alıcılar zərdabdakı kənar zülallara qarşı təhlükəli immun reaksiyalar yarada bilər - və faydalı miqdarda toplamaq çətindir.

Antikorlar dəqiq şəkildə hədəflənir: hər növ müəyyən bir yad zülala cavab verir və xüsusi ağ qan hüceyrəsi və ya onun törəmələri tərəfindən istehsal olunur. (Bunun kimi genetik cəhətdən eyni hüceyrə xətti “klon” kimi tanınır.) 1970-ci illərdə Kembric Universitetinin tədqiqatçıları – alman bioloqu Georges Köhler və argentinalı biokimyaçı Sezar Milşteyn antikor istehsal etməyin yolunu tapdılar. bədən xaricində. Bu, antikor istehsal edən ağ qan hüceyrəsini sürətlə yayılan xərçəng hüceyrəsi ilə birləşdirməyi əhatə edirdi. Metod tibbi cəhətdən faydalı olmaq üçün kifayət qədər miqdarda hər hansı bir xüsusi antikor istehsal edə biləcəyini sübut etdi.

Belə "monoklonal" anticisimlər o vaxtdan bəri astma, Crohn xəstəliyi, revmatoid artrit, dağınıq skleroz, müxtəlif xərçəng növləri və daha çoxunun müalicəsi kimi işlənib hazırlanmışdır, monoklonallar 2018-ci ildə satış üzrə ilk on dərman preparatının altısını təmsil edirdi. Bununla belə, istehsal etmək ümumiyyətlə bahalı olan monoklonallar insanlarda yoluxucu xəstəliklərlə mübarizə aparmaq üçün nadir hallarda inkişaf etdirilmişdir. Əvəzində virus təhlükələrinə qarşı peyvəndlər, bakterial təhlükələrə qarşı isə antibiotiklər yerləşdirilib.

O vaxtdan bəri MERS epidemiya azaldı və Bosch antikor dondurucusunu bağladı, o, koronavirusları öyrənməyə davam etdi, buna görə də bu ilin əvvəlində Çinin Wuhan şəhərində pnevmoniyaya bənzər bir xəstəliyin baş verməsi haqqında hekayə ona çatanda, o, çoxlarından daha çox diqqət yetirdi. Wuhan Bələdiyyə Səhiyyə Komissiyası naməlum infeksiyanın iyirmi yeddi hadisəsini elan etdi və Bosch "dərhal həyəcanlandığını" söylədi. Səbəbi hələ heç kim bilmirdi, lakin bəziləri canlı heyvan bazarlarının bu işə qarışdığını düşünürdülər. Bosch başqa bir koronavirusun növ baryerini keçə biləcəyindən şübhələnirdi. "Və bir koronavirusoloq olaraq, siz laboratoriyada bunu azaltmaq üçün nə edə bilərsiniz?" dedi. "Mən dərhal dondurucuda saxladığımız antikorları düşündüm."

İşə qayıtdığı ilk günlərdə Bosch Rotterdamdakı Erasmus Tibb Mərkəzində hüceyrə bioloqu Frank Grosveld və antikor layihəsi üzrə tərəfdaşını çağırdı və bütün əlli bir nümunənin əriməsini müzakirə etdi. Bir neçə gün ərzində Çin yeni patogenin genetik ardıcıllığını açıq şəkildə paylaşdı və Boschun fərziyyəsi təsdiqləndi - bu bir koronavirus idi, məsələn SARSMERS.

Bosch və Grosveld ərimiş antikorlarını yeni koronavirusa qarşı sınamağa can atırdılar. Amma nümunələri SARS-CoV-2 hələ Hollandiyada mövcud deyildi və nə Bosch, nə də Grosveld laboratoriyalarında belə təhlükəli patogenlə işləmək üçün tələb olunan biotəhlükəsizlik tədbirləri yox idi. Beləliklə, antikorları yoxlamaq üçün yan yanaşmadan istifadə etdilər. Bu, yeni koronavirusun malik olduğu eyni sünbül zülallarını mənimsəmək üçün daha az riskli bir virusa səbəb oldu. Beləliklə, tədqiqatçılar onların antikorlarının yapışıb-bağlanmayacağını görə bildilər. Bu, partlayıcı materialdan ayrıldıqdan sonra bombanın detonatorunda deaktivasiya strategiyalarını sınaqdan keçirmək kimi olardı.

Bir həftə və ya daha çox zəhmətkeş işdən sonra onlar müəyyən etdilər ki, kolleksiyalarındakı antikorlardan dördü antikorun bir seqmentinə bağlanır. SARS-CoV-2 sünbül proteini. Bu, sadəcə birinci addım idi. "Sünbül zülalına bağlanmaq bir şeydir, ancaq infeksiyanın qarşısını almaq başqa bir şeydir" dedi Bosch. Bəzi antikorlar birincini edə bilər, amma ikincisini edə bilməz. Növbəti addım hansı antikorların hər iki qutunu yoxladığını görmək idi.

Zülal örtüyü ilə örtülmüş viruslar, adətən, bu zülallardan hüceyrələrə nüfuz etmə və yoluxdurma prosesində istifadə edir. Birincisi, bir virion bir reseptorla hədəf hüceyrənin membranına yerləşir. Sonra, membranın birləşməsi adlanan prosesdə, o, membranla bir məsamə əmələ gətirən şəkildə birləşir və virion hüceyrənin daxili hissəsinə daxil ola bilər və nəticədə özünü təkrarlamaq üçün müxtəlif hüceyrə funksiyalarını öhdəsinə götürür. Zərərsizləşdirici antikorlar tez-tez virusların hədəf hüceyrələrində uyğun reseptorlarla birləşməsinin qarşısını alaraq onları bloklayır. Lakin Bosch komandasının tədqiq etdiyi və 47D11 adlandırdıqları bir antikorun başqa bir fəaliyyət mexanizmi var idi: membranın sonrakı birləşmə prosesinə müdaxilə edərək virusların qarşısını almaq.

Bosch laboratoriyasında doktorluq namizədi Chunyan Wang, mikroskop altında materiala baxmaq üçün flüoresan boyadan istifadə edərək, 47D11-in hiyləsini etdiyini ilk görən oldu. Wang xəbəri çatdırmaq üçün Boschun ofisinə qaçdı. Bir neçə həftə ərzində Bosch və Grosveld öz ilkin nəticələrini həmyaşıdları nəzərdən keçirmədən açıqladılar. Yerli televiziyanın xəbər qrupu laboratoriyaya baş çəkib. Bu, kənar şəxslərin içəri girməsinə son dəfə icazə verildi. İki gün sonra Hollandiya kilidləmə versiyasına keçdi.

Televiziya seqmenti yayımlananda kəşfin gərgin şəraitini göstərdi: ətrafa səpələnmiş yüzlərlə stəkanlar, borular və butulkalar, stulların üzərinə örtülmüş laboratoriya paltarları. Və Wang'ın sıçrayışı yalnız uzun bir prosesin başlanğıcı idi: 47D11 proxy sistemində təsirli görünə bilər, lakin komanda onu orijinal virusa qarşı sınaqdan keçirməli idi. Antikorları lazımi biotəhlükəsizlik tədbirləri ilə laboratoriya idarə edən Grosveld-in həmkarı Bart Haagmansa göndərdilər. O, yeni koronavirusu antikorla qarışdıraraq və qarışığı hüceyrə mədəniyyətinə daxil edərək təcrübə aparıb.

Bazar günü gecə Haagmans Bosch-a yaxşı xəbər göndərdi: 47D11 canlı virusa qarşı işlədi. "Mən təsirini dərhal anladım" dedi Bosch. Bu, zərərsizləşdirə bilən ilk antikor idi SARS-CoV-2 laboratoriyada. Bütün gecəni oyaq qalıb kağızı bitirdi. Zərərsizləşdirilən antikorların dondurulması SARS öz bəhrəsini verən bir mərc idi.

Digər tədqiqatçılar, dünyanın başqa yerlərində, antikor terapiyalarını inkişaf etdirmək yarışında öz xüsusi aktivlərinə sahib idilər. COVİD-19. Bu yaxınlara qədər British Columbia Universitetində fizika və mühəndislikdən dərs deyən Karl Hansen üçün əsas antikorların kütləvi şəkildə yoxlanılması texnikası idi. Biz ilk dəfə martın ortalarında danışdıq, Kanada mühasirəyə düşdüyü kimi, Hansen Avstraliyada sörfçülərin Məkkəsi olan Noosa adlı bir sahil qəsəbəsində tətildə idi. Qitədə mindən az təsdiqlənmiş hadisə ilə Noosa, "Sahildə" filmindəki Melburn kimi idi, xaricdən zəhərli bir buludun gəlməsini və əhalinin üzərinə enməsini gözləyirdi. "Bir şeyin baş verdiyini bilməyəcəksiniz" dedi.

On ildən çox əvvəl Hansen iki yüz min tək hüceyrənin eyni vaxtda ölçülməsini həyata keçirə bilən “mikro-maye” sistemi hazırlamağa kömək etdi – bu, adi laboratoriya skamyasında mümkün olandan qat-qat çox. Bu texnologiya indi Hansenin qurduğu Vankuverdə yerləşən AbCellera adlı şirkətin əsasını təşkil edir. AbCellera erkən sağalma dövründən qan aldıqda COVİD-19 xəstə, onun texniki işçiləri mikrofluidik cihazlara yüklənmiş antikor yaradan immun hüceyrələri üçün nümunəni diqqətlə süzdülər. 5,5 milyondan çox antikor istehsal edən hüceyrə yoxlanıldı, əlavə testlər hovuzu birləşdirən beş yüz antikora endirdi. SARS-CoV-2. Hansenin komandası həm çox güclü, həm də istehsalı nisbətən asan görünən birində qərarlaşdı. Amerika əczaçılıq nəhəngi Eli Lilly & Company ilə ortaq şəkildə AbCellera 1 iyunda antikor üçün klinik sınaqlara başladı. Hansen dedi ki, dərmanın kəşfi və inkişaf prosesinin baş vermə sürəti - illər əvəzinə həftələr - "dərmanların necə inkişaf etdirildiyini yenidən qiymətləndirmək fürsətini" göstərir.

Antikor istehsalında təcrübə, mərkəzi ofisi Tarrytown, Nyu-Yorkda yerləşən Regeneron Pharmaceuticals-ı Knicks-in hazırda boş olan praktika müəssisəsinin qarşı tərəfində fərqləndirir. Onun baş elmi işçisi Corc Yankopulos hələ Kolumbiyada molekulyar immunologiya üzrə aspirant idi, o zaman səksəninci illərin ortalarında Bosch və Groseveldin sonradan insan anticisimləri istehsal etmək üçün istifadə etdiyi siçana bənzər “insanlaşmış” transgen siçan yaratmağı təklif edirdi. . Regeneron uzun illərdir ki, monoklonallar və digər mürəkkəb “bioloji preparatlar” istehsal etdiyi üçün istehsalı sürətlə artırmaq üçün sənaye təcrübəsinə və imkanlarına malikdir. Regeneronda cərgə parıldayan on min litrlik çənlər var - qida məhlulu və antikor istehsal edən hüceyrə xətləri ilə doldurmağa hazır bioreaktorlar. Antikorlar kəmiyyətcə yığıldıqdan sonra problem onları tanklardakı yararsız zibildən ayırmaqdır. Bunun üçün mayenin sentrifuqadan və getdikcə daha incə filtrlərdən keçirilməsi, antikorların effektiv şəkildə konsentrasiyası üçün onun təmizlənməsi və tamponlanması tələb olunur. Şirkətin klinikadan əvvəlki istehsal və proseslərin inkişafı üzrə baş vitse-prezidenti Hanne Bak deyir ki, Regeneron istehsal prosesinə “biz molekulu görməmişdən əvvəl” başlaya bilər. "Sonra hüceyrə xəttini aldığımız gün onu sadəcə daxil edirik."

AbCellera kimi, Regeneron da öz antikorlarını çoxlu rekonvalesentlərin plazmasında müəyyən edilmiş böyük bir namizəd havuzundan seçdi. COVİD-19 xəstə, bəziləri transgen siçanların plazmasında. "Seçmək üçün mümkün olan ən böyük kolleksiyaya sahib olmağın dəyəri ondan ibarətdir ki, siz həqiqətən istədiyiniz hər bir əmlakı optimallaşdıra biləcəksiniz" dedi Yankopoulos. O, həm virusu zərərsizləşdirməkdə yüksək təsirli, həm də uzunmüddətli antikorlar istədi. Ancaq o, yalnız birini seçmədi: Regeneronun mərc etdiyi koronavirus terapiyası bir kokteyldir. Müxtəlif növ antikorlar eyni zülalın müxtəlif hissələrinə yapışa bilər və birlikdə virusu hər hansı birindən daha effektiv şəkildə zərərsizləşdirə bilər. Bundan əlavə, əgər virus mutasiya edərsə və antikorlardan birini qaçırsa, o, yenə də digərinə qarşı həssas ola bilər. Regeneron 11 iyunda klinik sınaqlara başladı və könüllülərə iki antikor qarışığı verdi.

Yarışa qoşulan başqa bir biotexnoloji şirkət, San-Fransiskoda yerləşən Vir Biotechnology, insan antikorunun yalnız üç həftə əvəzinə, qan dövranında daha uzun müddət, bəlkə də on iki həftəyə qədər sağ qalması üçün dəyişdirilməsinə diqqət yetirdi. Vir bu manipulyasiya edilmiş anticisimləri indi ortağı GlaxoSmithKline ilə birlikdə bu yayın sonunda başlamağa ümid etdiyi klinik sınaqları dəstəkləyəcək miqdarda istehsal edir. İyun ayında Harbour BioMed şirkəti Utrext Universiteti və Erasmus Universiteti Tibb Mərkəzinin iştirakı ilə İllinoys ştatında yerləşən biofarmasötik şirkət AbbVie ilə Bosch-un 47D11 istehsalında əməkdaşlıq etməyə razılaşdı—əvvəlcə klinik sınaqlar üçün, sonra isə nəticələr ümidvericidirsə , tibbi istifadə üçün.


Antikorlar yalnız SARS-CoV-2 RBD-ni hədəf alır

Həm SARS-CoV-2, həm də SARS-CoV RBD-yə çarpaz bağlanma qabiliyyətinə malik olan antikorların tapılması nisbətən yaygındır, lakin çarpaz neytrallaşdırıcı reaksiyalar nadir ola bilər (Lv H. et al., 2020). SARS-CoV-2-ni xüsusi və seçici şəkildə hədəfləyən potensial antikorların dizaynı və inkişafı vacibdir (Cədvəl 2). İnsan faqlarının göstərilməsi texnologiyası, antikorların müəyyən edilməsi və optimallaşdırılmasının inkişafında inqilab edən, yoluxucu xəstəliklərdə terapevtik mAb-ların ixtirasında gələcək tətbiqlər üçün sıçrayış nöqtələrini təmin edən güclü bir vasitədir (Alfaleh et al., 2020).

CƏDVƏL 2

Potensial antikorlar yalnız SARS-CoV-2-ni hədəf alır.

Ab adıAb növüAb mənbəyiNeytrallaşdırma mexanizmi
3F11sdAbİnsanRBD ilə bağlanmaq üçün ACE2 ilə rəqabət aparır (Yu et al., 2020)
BD-368-2lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Cao və digərləri, 2020)
Ab1 lgG1lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Li W. et al., 2020)
CB6lgGİnsanRBD-yə bağlanmaq üçün ACE2 ilə rəqabət aparır (Shi et al., 2020)
B38 H4lgGİnsanRBD-yə bağlanmaq üçün ACE2 ilə rəqabət aparır (Dong et al., 2020 Jahanshahlu and Rezaei, 2020)
B5lgGİnsanRBD-yə bağlanır, lakin qismən ACE2 ilə rəqabət aparır (Dong et al., 2020 Jahanshahlu və Rezaei, 2020)
H2lgGİnsanRBD-yə bağlanır, lakin ACE2 ilə rəqabət göstərmir (Dong et al., 2020 Jahanshahlu və Rezaei, 2020)
P2C-1F11lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Ju və digərləri, 2020)
P2B-2F6
P2C-1A3
rRBD-15lgGİnsanRBD-ACE2-nin qarşılıqlı təsirinin qarşısını alır (Ho, 2020 Yu et al., 2020)
311mAb�lgGİnsanRBD-ACE2-nin bağlanmasını bloklayır (Chen X. et al., 2020)
311mAb�
CC12.1lgGİnsanRBD-A epitopunu hədəfləyir (Rogers et al., 2020)
COVA1-18lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Brouwer və digərləri, 2020)
COVA2-15
H11-D4lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Huo et al., 2020a)
H11-H4
COV2-2196lgGİnsanRBD-yə bağlanmaq üçün ACE2 ilə tamamilə rəqabət aparır (Zost et al., 2020)
COV2-2130
2-15lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Yu və digərləri, 2020)
HA001lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Yi və digərləri, 2020)
II62lgGİnsanRBD-ACE2 qarşılıqlı əlaqəsini pozur (Parray və digərləri, 2020)
n3088Nano kimsəİnsanRBD-də yerləşən sirli epitopu hədəfləyir (Dong et al., 2020 Wu et al., 2020)
n3130
CV30lgGİnsanS-ACE2 qarşılıqlı təsirinin qarşısını alır (Seydoux və digərləri, 2020)
CV1/CV35

Bu siqnal sahəsi antikoru 3F11 RBD-nin ACE2-yə bağlanmasını tamamilə bloklayır və IC ilə neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir.50 SARS-CoV-2 virusunun zərərsizləşdirilməsi analizində 0,4360 μg/mL dəyəri. Üstəlik, SARS-CoV-2 psevdotipli virusa giriş analizində, sdAbs insan lgG1 kristallaşan fraqmenti (Fc) ilə birləşdikdə, rekombinant 3F11 IC ilə SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşır.50 dəyəri 0,0020 μg/mL (Yu et al., 2020).

BD-368-2 psevdotiplənmiş SARS-CoV-2 və orijinal SARS-CoV-2-ni IC ilə neytrallaşdıran antigenlə zənginləşdirilmiş B hüceyrələrinin yüksək məhsuldarlıqlı tək hüceyrəli RNT və VDJ ardıcıllığından istifadə etməklə 60 donordan təcrid edilib.50 müvafiq olaraq 1,2 və 15 ng/ml. BD-368-2, ACE2-RBD bağlama domeni ilə üst-üstə düşən epitopu hədəfləyir, buna görə də BD-368-2 effektiv NMAbs hədəfləyən RBD ola bilər (Cao və digərləri, 2020).

Yüksək yaxınlıqlı mAb, IgG1 ab1, fajla göstərilən Fab, tək zəncirli fraqment dəyişkən bölgəsi (scFV) və VH kitabxanalarından sürətlə müəyyən edildi. IgG1 ab1, ACE2-yə RBD-nin qarşısını almaqla orijinal SARS-CoV-2 infeksiyasına qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir. IgG1 ab1 ardıcıllığı nisbətən az mutasiyaya malikdir və təhlükəsizlik çatışmazlıqları yoxdur, beləliklə, lgG1 ab1 SARS-CoV-2 infeksiyası üçün potensial terapevtik vasitəyə çevrilmişdir (Li W. et al., 2020).

Rekonvalesent donorların insan B hüceyrələri vasitəsilə müəyyən edilən CB6, sterik maneə və interfeys qalıqları ilə rəqabət yolu ilə RBD-nin ACE2 reseptoruna bağlanmasının qarşısını alır. CB6, ND ilə SARS-CoV-2 psevdovirusuna qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir50 0,036 μg/ml dəyərləri (Shi et al., 2020).

RBD epitoplarına bağlı olan dörd antikor, B38, H4, H2 və H4, COVID-19 sağalma donorlarının periferik qanından müəyyən edilir. H4 SARS-CoV-2 infeksiyasını IC ilə bastırır50 dəyəri 0,896 μg/mL, B38 isə IC ilə SARS-CoV-2 virus infeksiyasını maneə törətmək üçün daha yüksək potensiala malikdir.50 dəyəri 0,177 μg/ml. İki antikor fərqli domenlərdə hərəkət edir, buna görə də B38 və H4 arasında heç bir rəqabət yoxdur, bu da klinikalarda immun qaçışının qarşısını almaq üçün virusu hədəfləmək üçün birlikdə istifadə etməyə imkan verir (Dong et al., 2020 Jahanshahlu və Rezaei, 2020).

P2C-1F11, P2C-1A3 və P2B-2F6 sağalmış xəstələrin plazmasından yoxlanılır. P2B-2F6 Fab ACE2–RBD bağlanmasını bloklamaq üçün S zülalı ilə rəqabət aparır. P2C-1F11, P2C-1A3 və P2B-2F6 IC ilə orijinal SARS-CoV-2-nin güclü inhibitorlarıdır.50 müvafiq olaraq 0,03, 0,28 və 0,41 μg/mL dəyərləri (Ju et al., 2020). rRBD-15 sintetik insan Fab antikor kitabxanası vasitəsilə müəyyən edilir və IC ilə SARS-CoV-2 psevdovirus infeksiyasına qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir.50 dəyəri 12,2 nM (Ho, 2020 Yu et al., 2020). 311mab-32D4 və 311mab-31B5 IC ilə RBD-nin hACE2 reseptoruna bağlanmasının qarşısını ala bilər.50 müvafiq olaraq 0,0450 və 0,0332 μg/mL dəyərləri. Üstəlik, 311mab� və 311mab� IC ilə SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir.50 SARS-CoV-2 psevdotipli virusa giriş analizində müvafiq olaraq 0,0698 və 0,0338 μg/mL dəyərləri (Chen X. et al., 2020).

Rekonvalesent donorların B hüceyrələrindən yüksək məhsuldarlıqlı sürətli sistemlə müəyyən edilən CC12.1 IC ilə SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir.50 SARS-CoV-2 psevdotipli virusa giriş analizində və IC ilə 0,019 μg/mL dəyəri50 orijinal SARS-CoV-2 infeksiyasına qarşı 0,022 μg/mL dəyəri. Bundan əlavə, CC6.30 və CC6.29 IC ilə SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir50 SARS-CoV-2 psevdotipli virusa giriş analizində müvafiq olaraq 1 ng/mL və 2 ng/mL dəyərləri (Rogers et al., 2020).

Digər iki antikor, COVA2-15 və COVA1-18, sağalma donorlarının B hüceyrələrindən əldə edilmişdir. Bu antikorlar IC ilə SARS-CoV-2 psevdovirus infeksiyasına qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərmişdir.50 hər ikisi və canlı zərərsizləşdirilməsi üçün 8 ng/mL dəyəri IC ilə SARS-CoV-2 infeksiyası50 7 və 9 ng/mL dəyərləri (Brouwer et al., 2020).

H11-H4 və H11-D4 RBD�-ni bloklamaq üçün ACE2-məcburi domenə yaxından bitişik olan və onunla bir qədər üst-üstə düşən epitopları hədəfləyir. Bundan əlavə, H11-D4 və H11-H4 nanobodies lgG Fc ilə birləşdirildikdə SARS-CoV-2-yə qarşı zərərsizləşdirici fəaliyyət göstərirlər. Nanobodies H11-H4 və H11-D4 müvafiq olaraq 12 və 39 nM KD ilə RBD ilə bağlanır. Tədqiqatlar göstərdi ki, H11-D4 və H11-H4 CR3022 antikoru ilə SARS-CoV-2-yə qarşı əlavə neytrallaşdırıcı fəaliyyətə malikdir, çünki o, fərqli bir bağlanma yerini tanıyır. Belə bir strategiya virusun mutasiya ilə qaçma ehtimalını azaltmaq üçün yaxşı bir yoldur (Huo et al., 2020a).

Rekonvalesent donorların limfositlərindən müəyyən edilən COV2-2196 və COV2-2130, RBD-də müxtəlif yerlərə bağlanaraq SARS-CoV-2 psevdovirus infeksiyasını neytrallaşdırır və hACE2 ilə qarşılıqlı əlaqəni tamamilə qarşısını alır. Buna görə də, həm COV2-2196, həm də COV2-2130 eyni vaxtda S zülalına bağlana və SARS-CoV-2 infeksiyasına sinergik neytrallaşdırıcı təsir göstərə bilər. COV2-2196 və COV2-2130-un tək və ya birlikdə istifadəsi SARS-CoV-2-nin müalicəsi və ya qarşısının alınması üçün perspektivlidir (Zost et al., 2020).

Yu və başqaları. beş ağır SARS-CoV-2 donorunun periferik qan mononükleer hüceyrələrindən (PBMCs) 61 NMAb müəyyən etdi, bunlar arasında orijinal SARS-CoV-2 infeksiyasına qarşı doqquz NMAb müəyyən edilmişdir. Ən güclü NMAb 2-15, IC ilə ACE2 ilə rəqabətli şəkildə bağlanan RBD vasitəsilə psevdotiplənmiş və orijinal SARS-CoV-2 infeksiyasını neytrallaşdıra bilər.50 müvafiq olaraq 5 və 0,7 ng/ml (Yu et al., 2020).

Bu yaxınlarda hazırlanmış SARS-CoV-2 reseptorunu bloklayan insan antikoru olan HA001-in SARS-CoV-2-də antikorları neytrallaşdırmaq üçün yeni bağlanma yerləri (RBD-də A475 və F486) ilə qarşılıqlı əlaqədə olduğu, lakin SARS-CoV-u tanıya bilmədiyi aşkar edilmişdir. Tədqiqat göstərir ki, SARS-CoV və SARS-CoV-2 arasında daha spesifik antikor dərmanları və profilaktik peyvənd hazırlamaq üçün anlayışlar təmin edən fərqli əsas epitoplar var (Yi və digərləri, 2020).

II62 scFv phage displey kitabxanasından istifadə edərək, yeni bir scFv müəyyən edildi. II62, RBD-də ACE2-nin bağlama domeni ilə bitişik və sıx üst-üstə düşən bölgəni hədəfləyir. Hilal və b. II62–scFv və onun RBD-ni hədəf alan və ACE2–RBD bağlanmasını kəsən digər iki formatı, scFv-Fc və IgG1 tapıldı. RBD-nin ACE2 reseptoruna mane olması konsentrasiyadan asılıdır (5-dən 0,008 mkm-ə qədər). Orijinal SARS-CoV-2 virusuna qarşı 100 μg/mL-ə qədər sınaqdan keçirildikdən sonra II62 neytrallaşdırıcı potensialda əhəmiyyətli azalma nümayiş etdirmir. Mümkün izahat ondan ibarətdir ki, o, yalnız S zülalının açıq post-fusion konformasiyasında əldə edilə bilər. S309 və S310 SARS-CoV-2 S zülalının birləşmədən sonrakı uyğunlaşmasını tanıyır və CR3022 SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı olmayan davranış nümayiş etdirir. Qeyri-NAb hüceyrə səthi infeksiyasının blokadasında mühüm rol oynayır in vivo COVID-19 üçün antikor əsaslı terapevtiklərin və diaqnostikanın təkmilləşdirilməsi üçün faydalı ola bilən virusun daxil olmasını narahat etmədən (Parray et al., 2020).

N3088 adlı nanokimsə tam insan sdAb kitabxanasından təcrid edilib və SARS-CoV-2-nin RBD-də yerləşən sirli epitopu hədəf alaraq SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir (Dong et al., 2020 Wu et al., 2020) .

Klinik xəstəliyin başlanğıcından 21 gün sonra SARS-CoV-2 ilə yoluxmuş xəstələrdən SARS-CoV-2 S zülalına xas B hüceyrələrini təcrid etdikdən sonra CV30 və CV1/CV35 SARS-CoV-2-yə qarşı neytrallaşdırıcı fəaliyyət göstərir. Bundan əlavə, CV30 RBD-ni ACE2-nin RBD-yə bağlanmasının qarşısını alacaq şəkildə bağlayır. CV1/CV35 RBD-dən uzaq bir domenə bağlanır və CV30-dan daha az neytrallaşdırıcı fəaliyyətə malikdir (Seydoux və digərləri, 2020).


Qan Məhsullarının Saxlanma Şərtləri

Qan və qan məhsullarının canlılığını təmin etmək üçün onların saxlandığı cihazlara ciddi nəzarət edilməlidir. Ümumi cihazlara soyuducu, dondurucu və trombosit inkubatorları daxildir.

Soyuducular havanın dövranı üçün fanla təchiz olunub və bütün sistemdə lazımi temperaturun saxlanmasını təmin etmək üçün tutum və dizayna malikdir.


Best storage temperature for samples - serum, protein, tissue, DNA, RNA - Archives (Feb/02/2009 )

Due to spatial limitations in our lab freezers i want to reorganize my samples. can anyone of you tell me where different kinds of samples should be longtime stored?

Serum
Doku
Proteinextracts
RNT
DNT
Bacterial Strains
Tissue Sections on Slides
.

Thanks for recommendations!

-moljul-
________________________________________________________________________________
_____________

Why don't you just keep them at the same temps. where they are stored right now. Even if you reorganize you shouldn't put them into different freezers. Sounds like an exam question to me -)


I help you anyway:
- DNA: Plasmids at -20C, Genomic at 4C. DNA can fall out of solution if stored at -20C. With plasmids that is no problem because you can vortex them and get them back into solution. Genomic DNA is dangerous to vortex because you might break the DNA
- RNA: Is less stable than DNA so we store it at -80. But you should be able to store it at -20C too
- Bacteria: -80C
- Serum: -20C
- Protein: - 20C
- Tissue: Depends. Ours are formalin fixed so we leave them in the fridge. Flash frozen samples in liquid nitrogen

-UGA80-
________________________________________________________________________________
_____________

-4`C -- Tissue section on slides
-20`C -- Serum, DNA, RNA, protein extracts
-80`C -- Bacterial strains (in LB),
-196`C -- Tissue

Along the same lines, I have been storing my protein samples, boiled in sample buffer at -20 degree. I have just been told that I shouldn't do this and samples should be stored at 4 degree. I ran fresh samples, got results, re-ran the same samples that I stored at -20 and got the exact opposite results. Same samples, same antibody dilutions, same everything, OPPOSITE results!! The only thing anyone can think of is that the protein precipitated in the freezer and I ran aggregated or precipitated proteins. I did forget to reboil the sample but it sat out at room temp for awhile and I didn't see any precipitated SDS. Could this have been the problem?

how long shelf life of protein extract (supernatant) in -20?
should it be stored in -80?

xiehanz on Mar 10 2009, 05ᚲ AM said:

Cell or tissue extracts in RIPA or similar buffers are best stored at -80 C, to get usefull results out of a Western blot do not store for more than one month at -20 C.

Antisera and purified antibodies do store well at -20 C or even at 4 C as long as there is no contamination (in one lab where I worked they sometimes had problems with yeasts growing in hybridoma supernatant despite being careful about sterility and keeping them all the time at 4 ).

rkay447 on Feb 3 2009, 05ᛣ AM said:

we always do protein storage at -80 C and in small aliquots. taking out proteins now and then from the forzen state may lead to their degradation due to persistent thawing and freezing. to prevent this, we also add glycerol to our protein prep. however, to keep samples for running on gel, u can add the SDS dye and keep it at room temp. or at 4 C for days together.

I work with the conditions that UGA80 talk abaout, but I have a specific question.
I understand the reason why it should be avoided to vortex gDNA. On the oder hand, why do you store your gDNA samples at 4 C? And how long do you store it there?

I store my gDNA (and DNA in general, purified PCR products, plasmids, primers) in fridge only for short-time storage, we have samples ages old, that reside in -20. But the main reason is not to freeze/thaw the DNA repeatedly when I'm using it all the time for a week or two. They are all in 10mM Tris pH 8, or TE. I don't vortex any of it when I take it out of the freezer, I tap it with a finger to mix it and spin.


Which Vaccines Need to be Frozen?

Mostly that means that they must be kept at a proper temperature, not getting too hot or too cold, “to protect quality and potency” of the vaccines.

While that can be a challenge in some parts of the world, as they go to great lengths to maintain the cold chain for vaccines, in developed countries, it typically means knowing whether to put the vaccine in the refrigerator or the freezer.

Unless of course something goes wrong…

Or did someone leave a freezer door open?

Maybe your older freezer just stopped working?

Or maybe someone just unplugged the freezer by mistake.

What do you do if something goes wrong and your frozen vaccines aren’t frozen anymore?

“If you find that a vaccine has been exposed to an inappropriate temperature, determine the reason for the temperature alteration, mark the vaccine “Do Not Use,” and contact the manufacturer or the state or local health department to determine if the vaccine can be used.”

Immunization Action Coalition on Ask the Experts about Vaccine Storage and Handling

Getting educated about proper vaccine storage and handling can avoid many incidents and help you be well prepared if something does go wrong. Once you are all set up and ready to store your vaccines, you just have to know where to put them.

Which Vaccines Need to be Frozen?

While most vaccines are refrigerated, some must be frozen.

Vaccines that are kept frozen should be stored in a freezer at a temperature of 5°F (-15°C) or colder.

Of available vaccines, only non-Refrigerator stable Varivax (chickenpox), non-Refrigerator stable ProQuad (the combo of Varicella and MMR or MMRV), and the shingles vaccine (Zostavax) must be frozen.

The MMR vaccine can be stored in either a freezer or a refrigerator.

The only time non-Refrigerator stable Varivax and non-Refrigerator stable ProQuad can be stored in a refrigerator (36° to 46°F, 2° to 8°C), is if you are going to reconstitute and use them within 72 hours. If the vaccines have been out of a freezer, and you don’t use them within 72 hours, then they must be discarded. You can’t put them back in the freezer.

Also, a reconstituted ProQuad vaccine can be stored at room temperature, protected from light, for up to 30 minutes. You must discard the vaccine if you don’t use it within that time though. It can’t be refrozen or refrigerated.

Making things a little more confusing, refrigerator stable versions of Varivax and ProQuad are also available. They have a shelf life of 24 months when refrigerated, but may also be stored in a freezer.

What To Know About Storing Vaccines in a Freezer

Vaccines must be kept at a proper temperature, not getting too hot or too cold, “to protect quality and potency” of the vaccines.


Templates and Spreadsheets

Download our reagent label templates, inventory spreadsheets, ordering spreadsheets, and freezer inventory templates to help with your lab inventory management.

Aliquot Stock Reagents

Aliquot stock reagents (e.g. serum, trypsin, etc.) to ensure you have fresh, uncontaminated supplies. Whether or not it’s a shared reagent, pre-measured aliquots are an effective way to reduce the chance of source contamination. Aliquoting stock reagents into smaller volumes also helps preserve the stability of the stock reagent by reducing the number of freeze-thaw cycles of the entire stock. Label the new containers with the contents, the date it was aliquoted, and expiry date, if applicable. As a bonus, if someone from another lab needs to borrow a reagent, you can give them a pre-prepared aliquot rather than your whole stock container.

Create a Departure Checklist

Whenever someone leaves the lab, complete a “departure checklist” that includes reviewing, organizing, labeling, or discarding stored reagents . This process will minimize the accumulation of reagents stored in the lab and ensure new lab members have space to store their own supplies.

You can be more efficient by wasting less time looking for reagents buried deep in the stockroom, fridge, or freezer. Another way to increase your efficiency is by adopting more efficient technologies for your research.

Efficient Tools and Technologies for Life Science Research

Accomplish more in less time and with less effort by making smarter choices for the tools you use in the lab, including cell isolation and cell culture technologies.


How to Set Up Your Own DIY Bio Lab

So you would like to try your hand at some biohacking. Professional labs cost hundreds of thousand of dollars to build from scratch, but you can get started for around $500 or less with a little improvisation and patience.

Large Equipment

Let’s start with the pieces that will take up the biggest chunk of space in your lab: refrigerator, freezer, autoclave, and incubator. If you are just planning to run through an educational biotech kit at home, you can probably get away with clearing some space in your kitchen fridge. However, if you are planning to do more than just a weekend project, then invest in a dedicated fridge and freezer for your experiments. The vast majority of educational kits out there are perfectly safe, but the average novice might not realize that some classical experiments (like isolating unknown bacteria) can be hazardous to your health if stored near food. Plus, you will eventually need the extra space anyway, and it will protect your experiments and edibles from cross-contamination.

Mini fridges can often be found on Craigslist for less than $50 — or free on Freecycle. If possible, avoid the kind that has a tiny freezer compartment at the top — they get iced over and are too small for practical use. Instead, try to find a mini freezer that is the same size as your fridge or get a 2-door fridge/freezer combo. Many modern household freezers have an auto-defrost feature that briefly warms up the cooling coil a few times a day to keep ice from building up. The resulting temperature fluctuations can be detrimental to sensitive biological materials such as restriction enzymes. Check if there is a way to disable the auto-defrost circuitry or simply put your enzymes inside a styrofoam box in the freezer.

An autoclave is essentially a big pressure cooker that heats growth media or equipment above the boiling point of water in order to sterilize them. Guess what — a regular pressure cooker makes for a fine autoclave as well. In a pinch, you can even use a microwave oven to sterilize growth media — just watch out for flash boiling! When you are ready to upgrade, professional autoclaves are surprisingly easy to find on Craigslist. Aim for one that is at least 7″ in diameter so you can fit decent-sized flasks, and expect to pay a few hundred dollars.

An incubator is used to grow cells at a carefully controlled temperature. You might be able to score an old egg incubator or yogurt maker at your local thrift store. You could also simply build your own by putting a heating pad with a thermostat in an old cooler. Pet stores sell heating pads intended to keep pet reptiles nice and toasty.

Benchtop Tools

A centrifuge is really useful for concentrating cells out of a liquid culture, separating DNA, proteins, and soluble components in complex mixtures, and more. Biohacker extraordinaire Cathal Garvey (@onetruecathal) designed a 3D-printable “dremelfuge” that can be chucked into a Dremel power tool to turn it into a centrifuge. However, unless your 3D printer is well tuned, they are prone to shattering at high speeds. You can order a high quality dremelfuge from Shapeways, but for that price you can also buy a cheap centrifuge on eBay. Inexpensive Chinese models running around 4000rpm can be had for $50–100, or 10,000rpm models for around $150. (You can also 3D print your own centrifuge using these instructions).

A commercial gel electrophoresis rig can cost a few thousand dollars, but it is essentially just a DC power supply and a plastic box with two electrodes. You can make a dirt-cheap electrophoresis power supply using a hardware store dimmer switch and a bridge rectifier. The gel box itself can easily be made out of dollar store plastic containers and a stainless steel or platinum wire for the electrode (check out this $21 gel box design by Cheapass Science).

You may also want a PCR (Polymerase Chain Reaction) machine. Again, commercial gear can cost thousands of dollars, but there are several DIY designs available online, and OpenPCR even sells an Open Source Hardware PCR kit for $599. Like most biotech hardware, a lot of used gear from professional labs eventually winds up on eBay or Craigslist. The independent online biohacker store The Odin has been buying up inexpensive, used PCR machines and reselling them after refurbishing.

You will need some way to generate a sterile field in which you can manipulate microorganisms without fear of contamination. An open flame from an alcohol lamp or Bunsen burner will do for starters. A simple laminar flow hood, often used for mushroom cultivation or plant tissue culturing, blows ultrapure HEPA-filtered air over the cultures. If you want to get really serious, you could upgrade to a biosafety cabinet instead. Professional labs often leave their biosafety cabinets behind when they move, so if you cultivate the right contacts and are willing to put in some serious elbow grease, you may be able to score one for free.

Lab Supplies

To manipulate small but very accurate amounts of liquids, you will also need a set of adjustable pipettes. Cheap Chinese pipettes can be bought from The ODIN and a few other places for around $40 a piece — you will want at least two or three different sizes to transfer anything from single-digit microliter droplets, to several milliliters.

Other smaller items you will need include digital thermometers, a few small digital scales with a resolution of 0.01g or better, boxes of nitrile gloves, and a variety of glassware and plasticware (check your local dollar stores!).


Videoya baxın: ANTIJEN-ANTIKOR KARSILASMASI (Noyabr 2022).