Məlumat

Hansı spesifik mutasiyalar apoptoz mexanizminin işləməməsinə səbəb ola bilər?

Hansı spesifik mutasiyalar apoptoz mexanizminin işləməməsinə səbəb ola bilər?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Hansı spesifik mutasiyalar hüceyrədəki apoptoz mexanizmlərinin işləməməsinə səbəb ola bilər? Bu cür mutasiyalar “geri dönə bilən”dirmi, yoxsa onlar ümumiyyətlə qalıcıdırlar? apoptoz mexanizmlərini pozmadan hansı mutasiyalar baş verə bilər?


Apoptozla bağlı problemlərə səbəb olan çoxlu və çoxlu spesifik tək mutasiyalar var.

Ən çox yayılmış bəziləri P53, PTEN, MYC, APC və KRAS-dadır. Xüsusi bir amin turşusu dəyişməsini istəyirsinizsə, KRAS G12D xüsusilə güclüdür. O, tənzimləyici domeni söndürməklə və KRAS-ın konstruktiv olaraq aktiv olmasına səbəb olmaqla işləyir.

Bunlar ciddi mənada "qaytarıla bilən" deyildir (zənnimcə, uduşlu lotereya biletini tutarkən ildırım vurması istisna olmaqla, eyni yerdə ikinci təkrarlama xətası ehtimalı orijinal baza), lakin bir çox hallarda hüceyrələr dərhal tam bədxassəli olmaq əvəzinə, kompensasiya yollarını tənzimləyir və ya qocalma yollarını aktivləşdirir.

O ki qaldı mutasiyalara etmə apoptozun pozulmasına səbəb olur, demək olar ki, sonsuz sayda var, çünki apoptozda iştirak etməyən genlərin səssiz mutasiyaları və ya mutasiyaları sayılmalıdır.

Əgər problem yaratmadan apoptoz üçün vacib olan genlərdə hansı növ qeyri-səssiz mutasiyaların baş verə biləcəyini nəzərdə tutursunuzsa, hələ də çox şey var: zülalların qeyri-aktiv hissələrində oxşar amin turşularının dəyişdirilməsinin böyük təsir göstərməsi ehtimalı azdır.


Eşitmə itkisində reaktiv oksigen növləri, apoptoz və mitoxondrial disfunksiya

Reaktiv oksigen növlərinin (ROS) istehsalı eşitmə toxumalarında bir neçə apoptotik və nekrotik hüceyrə ölüm yollarında iştirak edir. Bu yollar yaşa bağlı eşitmə itkisi, irsi eşitmə itkisi, ototoksik dərmanların səbəb olduğu eşitmə itkisi və səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisi də daxil olmaqla, sensorinöral eşitmə itkisinin əksər növlərinin əsas səbəbləridir. ROS istehsalı disfunksional mitoxondrial oksidləşdirici fosforlaşma və ROS ilə əlaqəli fermentlərin artması və ya azalması ilə tetiklene bilər. Apoptotik hüceyrə ölüm yolları əsasən ROS istehsalı ilə aktivləşsə də, ROS istehsalından asılı olmayan eşitmə itkisi ilə əlaqəli digər yollar da var. Endoplazmik retikulum stressi və nekrotik hüceyrə ölümü kimi digər yolların əlavə tədqiqatları tələb olunur.

1. Giriş

Hidroksil radikalları, superoksid anionları, hidrogen peroksid və təkli oksigen kimi reaktiv oksigen növləri (ROS) əsasən əksər məməli hüceyrələrində mitoxondriyalar tərəfindən əmələ gəlir [1, 2]. Hüceyrə mübadiləsinin zəhərli məhsulları kimi qəbul edilən ROS bir çox fizioloji prosesləri tənzimləyən siqnal molekulları kimi fəaliyyət göstərə bilər [3]. ROS həm fizioloji, həm də patoloji şəraitdə apoptoz induksiyasında mühüm rol oynayır Əvvəlki tədqiqatlar göstərmişdir ki, oksidləşdirici stress həm xarici hüceyrə ölümü reseptor yolu, həm də daxili mitoxondrial hüceyrə ölüm yolu [4] vasitəsilə hüceyrə apoptoza səbəb ola bilər. ROS-un yığılması və sonrakı apoptoz induksiyası bir sıra xəstəliklərə və yaşlanmaya mühüm töhfə verir [5].

Yüksək ROS formalaşması və sonrakı apoptoz induksiyası bir neçə eşitmə itkisi patologiyalarının inkişafında iştirak etmişdir [6]. Bundan əlavə, mitoxondrial disfunksiya bəzi eşitmə itkisi növlərində mühüm rol oynayır [7]. Bu araşdırmada biz eşitmə itkisi patologiyasında ROS, mitoxondrial disfunksiya və apoptoz induksiyasının iştirakına diqqət yetirəcəyik.

2. Koklea və Eşitmə İtkisi

Koklea daxili qulağın son eşitmə orqanıdır. Korti orqanı kokleanın əsas komponentidir və iki növ hiss saç hüceyrəsini ehtiva edir: daxili və xarici saç hüceyrələri. Səs təzyiqi dalğası kokleanın bazasından zirvəsinə keçdikdə, kokleanın bazilyar membranı titrəyir [8]. Saç hüceyrələrinin mexaniki orqanoidləri olan stereosiliyanın yerdəyişməsi bazilyar membran vibrasiyası ilə nəticələnir və ötürücü ion kanallarını açır. Bu, kalium və kalsium ionlarının daxil olmasına səbəb olur və saç hüceyrəsinin yan divarı və bazası boyunca gərginliyə bağlı kalsium kanallarını aktivləşdirən transduksiya cərəyanı yaradır [9]. Daxili saç hüceyrələri postsinaptik afferent neyron üçün akustik siqnalları kodlaşdırmaq üçün neyrotransmitter glutamatı buraxır [10]. Xarici saç hüceyrələri daxili saç hüceyrələrinə nisbətən zədələnməyə daha həssasdır.

Kokleanın quruluşunu və ətraf mühitini qoruyan digər komponentlər və dəstəkləyici hüceyrələr var. Stria vascularis və spiral bağ kokleanın yan divarında yerləşir və endokoklear potensialı (EP) yaradır [11]. EP kokleanın endolimfatik məkanında müsbət gərginlikdir və potasyum cərəyanının ötürülmə kanalları vasitəsilə ötürülməsi və saç hüceyrələrinin stimullaşdırılması üçün vacibdir [12]. Spiral qanqlion modiolusda yerləşir və neyron səs məlumatını saç hüceyrələrindən beyinə ötürür. Bir neçə növ dəstəkləyici hüceyrələr kokleada yerləşir və kokleanın homeostazını və vibrasiyasını qoruyur, lakin bəzi mexaniki funksiyalar hələ də araşdırılır [13].

Eşitmə itkisi səsə həssaslığın azalmasıdır və təxminən iki növə bölünür: qazanılmış eşitmə itkisi və irsi eşitmə itkisi. Qazanılmış eşitmə itkisinin tanınmış növləri ototoksik dərmanlarla əlaqəli eşitmə itkisi (ODIHL), yaşa bağlı eşitmə itkisi (ARHL) və səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisidir (NIHL). Hər növ eşitmə itkisinin patoloji xüsusiyyətləri fərqlidir. ODIHL, ototoksik dərmanların qəbulu nəticəsində yaranan geri dönməz eşitmə itkisidir və əsas mexanizm tük hüceyrəsinin itirilməsidir [14]. NIHL yüksək səslərə məruz qalma nəticəsində yaranan qismən geri dönməz eşitmə itkisidir və əsas mexanizmlər Korti orqanının mexaniki zədələnməsi, saç hüceyrələrinin və spiral qanqlionun itməsidir [15]. Presbycusis kimi də tanınan ARHL, yaşlanma ilə əlaqəli mütərəqqi eşitmə itkisidir və əsas mexanizmlər saç hüceyrələrinin, spiral qanqlion hüceyrələrinin və stria vascularis hüceyrələrinin itirilməsidir [16]. Siçan modelində səs-küyə məruz qalma və ya yaşlanmada eşitmə itkisi olmadan sinir zədələnməsi təklif olunur [17]. İrsi eşitmə itkisi kokleanın bəzi komponentlərinin, məsələn, tük hüceyrəsi [18], tektorial membran [19] və EP [20, 21] kimi yaxşı tədqiq edilmiş komponentlərinin disfunksiyası nəticəsində yaranır.

3. Eşitmə İtkisi ilə Bağlı Mitoxondrial DNT Mutasiya Xəstəlikləri

Zülalları kodlayan bir çox xromosom genləri miyozin [18], hüceyrədənkənar matris [19], kadherin [22], ion kanalları [23] və transfer RNT (tRNA) və ya ribosomal RNT (rRNA) kodlaşdırması kimi irsi eşitmə itkisi ilə əlaqələndirilmişdir. mitoxondrial genlər [24]. Bu yaxınlarda mitoxondrial rRNT və ya tRNT-ni kodlayan müəyyən gen mutasiyalarında mitoxondrial disfunksiya mexanizmləri təsvir edilmişdir. Aminoqlikozidlərə qarşı həssaslıqla irsi eşitmə itkisi növbəti bölmədə müzakirə olunacaq.

Mitoxondrial miopatiya, ensefalopatiya, laktik asidoz və vuruşa bənzər epizodlar (MELAS) sindromu [25] hamısı eşitmə itkisi ilə əlaqələndirilir [26, 27]. MELAS mutasiyaları mitoxondrial genlərdə baş verir [24, 26] və mitoxondrial disfunksiyaya səbəb olur. Mitoxondrial tərcümə mexanizmləri xromosom tərcüməsindən müstəqildir və mitoxondrial tRNT-ni kodlayan genlər mitoxondrial DNT-də kodlanır. Ən çox yayılmış MELAS mutasiyası mitoxondrial lösin tRNT-nin strukturunu dəyişdirən 3243A>G mutasiyasıdır. Üstəlik, mitoxondrial lösin tRNT-nin antikodon halqasının üçüncü nukleotidi urasildir və taurini dəyişdirən fermentlər tərəfindən dəyişdirilir. Fermentlərin xromosomlarda kodlanmış GTP bağlayan zülal 3 (GTPBP3) və mitoxondrial tərcümənin optimallaşdırılması 1 (MTO1) [28, 29] olduğu fərz edilir. tRNT-də struktur dəyişikliyi urasilin taurin modifikasiyasını maneə törədir [30]. tRNT-nin dəyişdirilmiş antikodon halqası adenin və guanini cütləşdirə bilər, dəyişdirilməmiş antikodon halqası adenini cütləşdirə bilər və dəyişdirilməmiş tRNT UUG-nin leykinə çevrilməsini maneə törədir. Mitoxondrial oksidləşdirici fosforlaşma (OXPHOS) ferment kompleksi I-in ND6 alt bölməsi mitoxondrial DNT-də kodlanır və onun üçlüləri UUG kodonunu saxlayır, buna görə də 3243A>G mutasiyası ilə mitoxondriyada ferment aktivliyi azalır [31]. OXPHOS elektron daşıma zəncirinin azalmış fəaliyyəti ROS istehsalının artmasına səbəb olur. Bu daha sonra mitoxondrial daxili membranda qeyri-spesifik yüksək keçiricilik keçiriciliyi keçid məsamələrinin açılmasına, mitoxondrial membran potensialının azalmasına, mitofaqiyanın artmasına və apoptotik hüceyrə ölümünə səbəb olur [32]. MTO1 mutasiyaları MELAS-a [33] oxşar simptomlar göstərir, baxmayaraq ki, onların koxlear funksiyaya təsiri zəif başa düşülür.

Mitoxondrial DNT-nin mutasiya dərəcəsi toxumalar arasında fərqlənir. Korti orqanının, stria vascularis və üz sinirinin saç hüceyrələrinə nisbətən spiral qanqlion hüceyrələrində və saccular makulada nisbətlər daha yüksəkdir [34]. Mutasiya sürəti ilə histoloji tapıntılar arasında yaxşı əlaqə vardır [35]. Bu nəticələr göstərir ki, toxumalar arasında OXPHOS aktivliyindəki fərqlər həm orqan fəaliyyətinə, həm də spesifik klinik simptomlara təsir göstərir.

4. Ototoksik dərmanların yaratdığı eşitmə itkisi

Klinik praktikada ototoksik dərmanların iki növü geniş məlumdur [36]: aminoqlikozid antibiotikləri və platin əsaslı xərçəng əleyhinə dərmanlar. Hər iki dərman sinfi apoptotik yollar vasitəsilə ROS istehsalı ilə əsasən Corti orqanında saç hüceyrələrinə zərər verir.

Aminoqlikozidlər geniş spektrli antibiotiklərdir və onların potensial ototoksiklik və nefrotoksikliklərinin yaxından monitorinqini tələb edir [37]. Nefrotoksiklik ümumiyyətlə geri çevrilir, çünki böyrəyin proksimal bükülmüş borularının hüceyrələri çoxalıb bərpa oluna bilir [38], lakin ototoksiklik geri dönməzdir, çünki kokleanın tük hüceyrələri çoxalıb bərpa oluna bilmir. Aminoqlikozidlər, ehtimal ki, diferensial apoptotik siqnalları tetikleyerek, daxili saç hüceyrələrinə nisbətən xarici saç hüceyrələrini zədələyir [39]. Bundan əlavə, yüksək tezlikli səsləri emal edən bazal növbə saç hüceyrələri, aşağı tezlikli səsi emal edən apikal növbədəki saç hüceyrələri ilə müqayisədə üstünlüklə zədələnir [40]. Beləliklə, aminoqlikozidlərin istifadəsi göstərişin diqqətlə klinik qiymətləndirilməsini tələb edir.

ROS indi aminoqlikozidlərin səbəb olduğu eşitmə itkisinin əsas təşəbbüskarı kimi müəyyən edilmişdir [41]. Aminoqlikozidlər saç hüceyrələrinin mitoxondrilərində toplanır [42] gentamisin birbaşa mitoxondrial ribosomlarda zülal sintezini maneə törədir [43] və mitoxondrial keçiriciliyə keçid məsamələrinin açılmasını tetikler [44].

1555A>G mitoxondrial DNT mutasiyası məlum aminoqlikozidlərə qarşı həssaslıqla irsi eşitmə itkisinə səbəb olur [45]. 12S rRNA geni mutasiya zamanı kodlanır və rRNT konformasiyasını aminoqlikozidlərlə normal konfiqurasiya olunduğundan daha sıx birləşmək üçün dəyişir [43]. Bununla belə, aminoqlikozidlərin rRNT ilə qarşılıqlı təsirinin dəqiq mexanizmi hələ də araşdırılır [46]. Aminoqlikozidlərə hiperhəssas eşitmə itkisi ilə əlaqəli mitoxondrial DNT-nin digər mutasiyaları son tədqiqatda aşkar edilmişdir [47].

Platin əsaslı xərçəng əleyhinə preparatlar tez-tez skuamöz hüceyrəli karsinoma adenokarsinoma və baş, boyun, ağciyər və sidik kisəsinin differensiallaşmamış karsinoması daxil olmaqla bir çox xərçəng növlərinin müalicəsində istifadə olunur [48]. Bununla belə, onlar kokleaya, böyrəklərə və neyronlara toksik təsir göstərirlər. Sisplatinin ototoksikliyi geniş şəkildə məlumdur [49] və ototoksiklikdən qorunma təklif edən dərmanlar tədqiq edilmişdir [50]. Sisplatin şiş hüceyrələrində DNT-nin çarpaz bağlayıcısı kimi çıxış edir, burada onun platin atomu purin əsaslarına bağlanır və hüceyrə proliferasiyasına mane olur, bu da hüceyrə siklini inaktivləşdirir və şiş hüceyrələrinin apoptozuna səbəb olur [51].

Sisplatin koxlear toxuma üzərində həm kəskin, həm də xroniki toksik təsir göstərir. Kəskin təsir saç hüceyrələrindəki transduksiya cərəyanlarının və gərginliyə bağlı kalsium cərəyanlarının [52] və stria vascularisdə cərəyanların reaksiyasının geri qaytarıla bilən inhibəsidir. Uzun müddət davam edən toksik reaksiya koxlear toxumanı ROS istehsalını və apoptotik hüceyrə ölümünə səbəb olan kalium keçiriciliyi dəyişikliyinə səbəb olur [53]. Bu xroniki təsirlər geri dönməzdir və xarici tüklü hüceyrələr [55], stria vascularisin marginal hüceyrələri [56] və spiral qanqlion hüceyrələri [57] daxili tük hüceyrələri ilə müqayisədə degenerasiyaya meyllidirlər. Sisplatinin ototoksikliyinin ən çox yayılmış növü ikitərəfli, yüksək tezlikli və sensorinöral eşitmə itkisi ilə nəticələnir [58].

Sisplatinə cavab olaraq xarici saç hüceyrələrində ROS əmələ gəlməsi sisplatinin sulfhidril fermentlər qrupuna bağlanmasını və nikotinamid adenin dinukleotid fosfatın (NADPH), mis və ya seleniumun tükənməsini təmsil edir [59]. Bu proseslər glutatyon peroksidaza və glutatyon reduktaza aktivliyi və NADPH oksidaz aktivləşdirmələri üçün vacibdir [60]. Altı NADPH oksidazından biri olan NADPH oksidaz 3 (NOX3) Korti orqanında yüksək şəkildə ifadə olunur [61]. Üstəlik, sisplatin müalicəsi zamanı NOX3-ün superoksid istehsalı artır [61]. Digər NADPH oksidazları da sisplatinin ototoksikliyi ilə əlaqəli ROS istehsalında vacibdir [60].

Artan ROS generasiyası xarici tüklü hüceyrələrin antioksidan müdafiə mexanizmlərini azaldır, mitoxondriyadan sitoxrom c-nin sərbəst buraxılmasına səbəb olur, kaspaz yollarını aktivləşdirir və apoptotik hüceyrə ölümünə səbəb olur [51]. Sitokrom c artımı həmçinin deoksiribonukleaz aktivliyini tetikleyen kaspaza-3 və kaspaza-9-u aktivləşdirir [62].

Yan divarın stria vascularisində və ya spiral qanqliyonda digər potensial apoptotik yollara nüvə faktoru kappa B (NF-) aktivləşməsi daxildir.

B) və azot oksidinin (NO) əmələ gəlməsi [56] və yüksək hərəkətlilik qrupu zülal 1 (HMG1), NO istehsalı və 4-hidroksinonenal (4-HNE) istehsalının aktivləşdirilməsi [63]. Siçovul modelində artan NO səviyyələri göstərilmişdir [64] və artan NF-B və induksiya olunan azot oksid sintazasının (iNOS) immunolabelləşməsi [65, 66] göstərilmişdir. Bu nəticələr göstərir ki, NO və iNOS stria vascularisdə apoptozu tetikler [66]. Modiolar toxumada HMG1 ifadəsinin böyrək toxumasına nisbətən daha yüksək səviyyəsi [67] və sisplatin müalicəsindən bir gün sonra spiral qanqlion hüceyrələrində iNOS-un artması [67] spiral qanqlionda müxtəlif apoptotik hüceyrə ölüm yollarının mövcud olduğunu göstərir.

5. Yaşla əlaqədar eşitmə itkisi

Əhalinin qocalması ilə ARHL yayılmasının artacağı gözlənilir [7, 68-70]. Ətraf mühit, irsi və tibbi amillər [71, 72] daxil olmaqla bir çox faktorlar tədqiq edilsə də, ARHL-nin dəqiq mexanizmi hələ başa düşülməyib.

Mitoxondrial DNT mutasiyalarının yığılmasının ARHL [73] kimi yaşa bağlı degenerativ xəstəliklərə səbəb olduğu ehtimal edilir. İnsanlarda koxlear toxumada mitoxondrial DNT mutasiyalarının artması göstərilmişdir [74]. Mitoxondrial DNT tez-tez və hüceyrə dövründən asılı olmayaraq təkrarlanır və mitoxondrial DNT mutasiyaları xromosom DNT mutasiyalarından daha çox toplanır, çünki mitoxondrial DNT-də qoruyucu histonlar yoxdur. Eyni mexanizm ARHL-nin siçan modellərində də təklif olunur [75, 76]. Əsas mitoxondrial DNT mutasiyaları mitoxondrial OXPHOS komplekslərini kodlayan genlərdə baş verir və disfunksional OXPHOS fəaliyyətinə səbəb olur. Disfunksiyalı mitoxondriyalarda ROS əmələ gəlməsi, mitoxondrial membran potensialının azalması və apoptotik yolların aktivləşməsi çox güman ki, saç hüceyrələrinin ölümünə səbəb olur, lakin digər yollar da ehtimal edilir.

ROS ARHL-də mühüm rol oynadığından [77], ARHL-yə qarşı antioksidantların əlavə edilməsinin təsiri öyrənilmişdir. Fischer 344 siçovulunda C vitamini, E vitamini, melatonin və lazaroid eşitmə həssaslığının qorunmasında və mtDNT delesiyalarının azaldılmasında plasebodan daha yaxşı təsir göstərmişdir [78]. C57BL/6 siçanlarında C vitamini ARHL-yə təsir etməmişdir [79], lakin çoxsaylı antioksidantların (L-sistein-qlutatyon qarışıq disulfid, riboz-sistein, NW-nitro-L-arginin metil esteri, vitamin B12, folat) birləşməsi. , və askorbin turşusu) nəzarət agentlərinə nisbətən eşitmə həssaslığının qorunmasına əhəmiyyətli dərəcədə yaxşı təsir göstərmişdir [80]. CBA/J siçanlarında A vitamini, C vitamini, E vitamini, L-karnitin və a-lipoik turşusu ilə əlavələr daxili qulaq toxumalarının antioksidant qabiliyyətini əhəmiyyətli dərəcədə artırdı, lakin tük hüceyrələrinin və spiral qanqlion hüceyrələrinin itkisini yaxşılaşdırmadı. ARHL-nin inkişafı [81]. Antioksidant əlavələri ilə ARHL-nin qarşısının alınması antioksidanın növü və dozası, müalicənin müddəti və vaxtı və növ kimi bir çox amillərdən təsirlənir.

ARHL-də apoptotik hüceyrə ölümündə daxili və xarici yollar iştirak edir. Daxili yol mitoxondrialdan asılıdır və mitoxondrial membran potensialının itirilməsi ilə tetiklenir. Xarici yol hüceyrə səthi reseptorlarına bağlanan liqandlar tərəfindən tetiklenir [82, 83]. Bundan əlavə, mitoxondrial proapoptotik genin, brassinosteroid həssas olmayan-1 ilə əlaqəli reseptor kinazın silinməsindən sonra ARHL-nin qarşısının alınması (Bak) [84], ARHL üçün daxili apoptotik yolun zəruri olduğunu göstərir.

6. Səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisi

Səs-küy də eşitmə itkisinin əsas səbəbidir [85]. Tez-tez ordu, klublar, diskotekalar və portativ audiopleyerlər ilə əlaqələndirilir, səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisinin yayılmasının gələcək illərdə artacağı proqnozlaşdırılır [15].

Səs-küyə məruz qaldıqdan sonra iki əsas yol koxlear zədələnmə ilə nəticələnir: mexaniki zədə [86] və apoptoz və ya nekrozu tetikleyen biokimyəvi yollar. Xarici saç hüceyrələri səs-küyə məruz qalmağa daxili saç hüceyrələrinə nisbətən daha həssasdır. Morfoloji nüvə dəyişiklikləri [87] və apoptotik markerlərdə artımlar, məsələn, kaspaza [88], şiş nekroz faktoru reseptoru [89] və əlaqəli promotorlar [90] siçan və ya siçovul modellərində baş verir. Bunlar səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisində apoptotik yolların əhəmiyyətini göstərir.

Heyvan modellərində səs-küyün səbəb olduğu eşitmə itkisində apoptotik hüceyrə ölümünü tetikleyen bir neçə yol tədqiq edilmişdir. Tədqiqatlar ROS və ya oxşar reaktiv növlərdə ümumi artımları aşkar etdi [91], lakin ROS formalaşması zamanla azalmağa meyllidir [92]. Səs-küyə məruz qaldıqdan sonra apoptoza səbəb olan amilin (AIF) və mitoxondrial endonükleaz G (EndoG) mitoxondrial sərbəst buraxılması qvineya donuz modellərində göstərilmişdir [93]. Proqramlaşdırılmış apoptoza daxil olan hüceyrələrə vasitəçilik edən mitogenlə aktivləşdirilmiş protein kinaz (MAPK) yollarını siqnal edən c-Jun N-terminal kinaz (JNK) qvineya donuzu modellərində səs travmasından sonra da artır [94]. Bundan əlavə, JNK siqnal yolları ROS formalaşması ilə aktivləşdirilir [95] və digər apoptotik yollar səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisində fərz edilir.

ROS istehsalından asılı olmayan digər yollar proqnozlaşdırılıb. Pulsuz artım

xarici tük hüceyrələrində [96] və ya aktivləşməsi və kalmodulinlə idarə olunan kalsineurinin [97] ROS istehsalı olmadan apoptotik və ya nekrotik hüceyrə ölüm yolunu tetikleyebilir. Vazoaktiv məhsulların [99] yaratdığı qan axınının azalması [98] işemiyaya gətirib çıxarır və koxlear toxumanın zədələnməsinə səbəb ola bilər. Nörotransmitter glutamatın daxili tük hüceyrələrindən həddindən artıq sərbəst buraxılması eşitmə sinirindəki sinaptik əlaqələrdə qüsurlara səbəb ola bilər və spiral qanqlion hüceyrələrinin ölümünə səbəb ola bilər [100].

7. Nəticə

ROS istehsalı və mitoxondrial apoptotik yollar bir çox eşitmə itkisində mühüm rol oynayır.Əsas ROS istehsal yollarına OXPHOS disfunksiyası, artan pro-ROS ferment aktivliyi və anti-ROS fəaliyyətinin azalması daxildir. Eşitmə itkisi yolları dəyişir və bəziləri araşdırılır. ER stressi və nekrotik hüceyrə ölümü kimi digər yollar da eşitmə itkisində iştirak edir. ROS, apoptoz və digər hüceyrə ölümünün tədqiqi daxil olmaqla, hər bir eşitmə itkisi növü üzrə əlavə tədqiqatlar tələb olunur.

Maraqlar toqquşması

Müəlliflər bu məqalənin nəşri ilə bağlı heç bir maraqların toqquşmadığını bəyan edirlər.

Müəlliflərin Töhfəsi

Teru Kamogashira və Chisato Fujimoto tədqiqata eyni dərəcədə töhfə verdilər.

İstinadlar

  1. R. S. Balaban, S. Nemoto və T. Finkel, "Mitoxondriya, oksidləşdiricilər və yaşlanma", Hüceyrə, cild. 120, yox. 4, səh. 483–495, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  2. J. F. Turrens, "Reaktiv oksigen növlərinin mitoxondrial formalaşması", Fiziologiya jurnalı, cild. 552, yox. 2, səh. 335–344, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  3. L. A. Sena və N. S. Chandel, "Mitoxondrial reaktiv oksigen növlərinin fizioloji rolları", Molekulyar hüceyrə, cild. 48, yox. 2, səh. 158–167, 2012. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  4. K. Sinha, J. Das, P. B. Pal və P. C. Sil, "Oksidativ stress: apoptozun mitoxondriyadan asılı və mitoxondriyadan müstəqil yolları", Toksikologiya arxivi, cild. 87, yox. 7, səh. 1157–1180, 2013. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  5. W. C. Orr və R. S. Sohal, "Drosophila melanogasterdə superoksid dismutaz və katalazanın həddindən artıq ifadəsi ilə ömrün uzadılması" Elm, cild. 263, yox. 5150, səh. 1128–1130, 1994. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  6. K. Op de Beeck, J. Schacht və G. Van Camp, “Qazanılmış və genetik eşitmə pozğunluğunda apoptoz: saç hüceyrəsinin proqramlaşdırılmış ölümü,” Eşitmə Araşdırması, cild. 281, yox. 1-2, səh. 18–27, 2011. Baxın: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  7. T. Yamasoba, S. Someya, C. Yamada, R. Weindruch, T. A. Prolla və M. Tanokura, “Yaşla bağlı eşitmə itkisində mitoxondrial disfunksiya və mitoxondrial DNT mutasiyalarının rolu”, Eşitmə Araşdırması, cild. 226, yox. 1-2, səh. 185–193, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  8. T. Ren, "Həssas kokleada bazilyar membran vibrasiyasının uzununa nümunəsi", Amerika Birləşmiş Ştatları Milli Elmlər Akademiyasının əsərləri, cild. 99, yox. 26, səh. 17101–17106, 2002. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  9. M. LeMasurier və P. G. Gillespie, "Saç hüceyrələrinin mexaniki ötürülməsi və koxlear gücləndirilməsi," Neyron, cild. 48, yox. 3, səh. 403–415, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  10. P. A. Fuchs, E. Glowatzki və T. Moser, "Koxlear tük hüceyrələrinin afferent sinapsı", Nörobiyologiyada Mövcud Rəy, cild. 13, yox. 4, səh. 452–458, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  11. A. N. Salt, I. Melichar və R. Thalmann, “Stria vascularis tərəfindən endokoklear potensialın yaranması mexanizmləri”, Laringoskop, cild. 97, yox. 8, hissə 1, səh. 984–991, 1987. Baxın: Google Scholar
  12. P. Wangemann, "Hiss ötürülməsinin dəstəklənməsi: koxlear mayenin homeostazı və endokoklear potensial", Fiziologiya jurnalı, cild. 576, yox. 1, səh. 11–21, 2006. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  13. S. S. Gao, A. Xia, T. Yuan və başqaları, "Spektral domen optik koherens tomoqrafiyası ilə vəhşi tip və eşitmə qüsurlu transgen siçanlarda koxlear yumşaq toxumaların kəmiyyət təsviri," Optik Ekspres, cild. 19, yox. 16, səh. 15415–15428, 2011. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  14. M. E. Huth, A. J. Ricci və A. G. Cheng, "Aminoqlikozidlərin ototoksikliyinin mexanizmləri və saç hüceyrələrinin qorunmasının hədəfləri", Beynəlxalq Otolarinqologiya jurnalı, cild. 2011, Məqalə nömrəsi 937861, 19 səhifə, 2011. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  15. O. Honq, M. J. Kerr, G. L. Polinq və S. Dhar, “Səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisinin anlaşılması və qarşısının alınması,” Xəstəlik-A-A, cild. 59, yox. 4, səh. 110–118, 2013. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  16. H. Chen və J. Tang, "Yaşla bağlı eşitmə itkisində mitoxondriyanın rolu", Biogerontologiya, cild. 15, yox. 1, səh. 13–19, 2014. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  17. S. G. Kujawa və M. C. Liberman, "Zədəyə təhqir əlavə etmək: "Müasir səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisindən sonra koxlear sinir degenerasiyası," Neuroscience jurnalı, cild. 29, yox. 45, səh. 14077–14085, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  18. X.-Z. Liu, C. Hope, J. Walsh et al., "Miyozin VIAA genindəki mutasiyalar, atipik usher sindromu da daxil olmaqla, geniş fenotipik spektrə səbəb olur," American Journal of Human Genetics, cild. 63, yox. 3, səh. 909–912, 1998. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  19. K. Verhoeven, L. Van Laer, K. Kirschhofer et al., “Mutations in human α-tektorin geni otozomal dominant qeyri-sindromik eşitmə pozğunluğuna səbəb olur. Təbiət Genetikası, cild. 19, yox. 1, səh. 60–62, 1998. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  20. Q. Gopen, G. Zhou, K. Whittemore və M. Kenna, "Enlarged vestibulyar su kanalı: mübahisəli aspektlərin nəzərdən keçirilməsi", Laringoskop, cild. 121, yox. 9, səh. 1971–1978, 2011. Baxın: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  21. X. Li, F. Zhou, D. C. Marcus və P. Wangemann, “Sıçanlarda koklear böyümə və genişlənmə zamanı endolimfatik Na + və K + konsentrasiyaları Slc26a4/pendrin,” PLoS BİR, cild. 8, yox. 5, Maddə ID-si e65977, 2013. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  22. Z. M. Əhməd, S. Riazuddin, J. Əhməd və başqaları, "PCDH15 gözün və qulağın neyrosensor epitelində ifadə edilir və mutant allellər həm USH1F, həm də DFNB23 üçün cavabdehdir" İnsan Molekulyar Genetikası, cild. 12, yox. 24, səh. 3215–3223, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  23. X. C. Li, L. A. Everett, A. K. Lalwani və başqaları, "PDS-də mutasiya qeyri-sindromik resessiv karlığa səbəb olur," Təbiət Genetikası, cild. 18, yox. 3, səh. 215–217, 1998. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  24. Y.-İ. Goto, I. Nonaka və S. Horai, “Mitoxondrial ensefalomiopatiyaların MELAS alt qrupu ilə əlaqəli tRNA Leu(UUR) genində mutasiya,” Təbiət, cild. 348, yox. 6302, səh. 651–653, 1990. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  25. Y. Oka, H. Katagiri, H. İşihara, T. Asano, T. Kobayaşi və M. Kikuçi, “β-Mitoxondrial tRNA(Leu(UUR)) gen mutasiyasının səbəb olduğu diabetes mellitusda hüceyrə itkisi və qlükoza səbəb olduğu siqnal qüsurları,” Diabet Təbabəti, cild. 13, yox. 9, əlavə 6, səh. S98–S102, 1996. Baxın: Google Scholar
  26. J. M. W. Van Den Ouveland, H. H. P. J. Lemkes, W. Ruitenbeek və başqaları, “Ana tərəfindən ötürülən tip II diabetes mellitus və karlıq ilə böyük bir nəsildə mitoxondrial tRMALeu (UUR) genində mutasiya,” Təbiət Genetikası, cild. 1, yox. 5, səh. 368–371, 1992. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  27. C. T. Moraes, F. Ciacci, G. Silvestri və başqaları, "İnsan mitoxondrial DNT-nin 3243-cü mövqeyində MELAS mutasiyası ilə əlaqəli atipik klinik təqdimatlar," Sinir-əzələ pozğunluqları, cild. 3, yox. 1, səh. 43–50, 1993. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  28. X. Li və M.-X. Guan, "tRNA modifikasiyası ilə əlaqəli bir insan mitoxondrial GTP bağlayıcı zülal, karlıqla əlaqəli mitoxondrial 12S rRNA mutasiyasının fenotipik ifadəsini modullaşdıra bilər" Molekulyar və Hüceyrə Biologiyası, cild. 22, yox. 21, səh. 7701–7711, 2002. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  29. M. Villarroya, S. Prado, J. M. Esteve və başqaları, “Mitoxondrial tRNT modifikasiyasında iştirak edən GTP bağlayan zülal olan insan GTPBP3-ün xarakteristikası,” Molekulyar və Hüceyrə Biologiyası, cild. 28, yox. 24, səh. 7514–7531, 2008. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  30. T. Suzuki, K. Miyauchi, T. Suzuki və başqaları, “TRNT antikodonlarında taurin tərkibli uridin modifikasiyaları ascidian mitoxondrilərdə qeyri-universal genetik kodları deşifrə etmək üçün tələb olunur”. Bioloji Kimya Jurnalı, cild. 286, yox. 41, səh. 35494–35498, 2011. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  31. T. Yasukawa, Y. Kirino, N. Ishii et al., "Mitoxondrial xəstəlikləri olan xəstələrdə mutant tRNA-larda yırğalanma modifikasiyası çatışmazlığı," FEBS məktubları, cild. 579, yox. 13, səh. 2948–2952, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  32. S. C. Zapico və D. H. Ubelaker, "mtDNA mutasiyaları və onların yaşlanma, xəstəliklər və məhkəmə elmlərində rolu," Yaşlanma və Xəstəlik, cild. 4, yox. 6, səh. 364–380, 2013. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  33. D. Ghezzi, E. Baruffini, T. B. Haack və başqaları, “MTO1 mitoxondrial-tRNT dəyişdiricisinin mutasiyaları hipertrofik kardiomiopatiya və laktik asidoza səbəb olur,” American Journal of Human Genetics, cild. 90, yox. 6, səh. 1079–1087, 2012. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  34. H. Koda, Y. Kimura, I. Ishige, Y. Eishi, Y. Iino, and K. Kitamura, “Mitoxondrial DNT 3243A   > G mutasiyalarının kəmiyyət hüceyrə səviyyəsində analizi. MELAS xəstəsi" Akta Oto-Laringologiya, cild. 130, yox. 3, səh. 344–350, 2010. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  35. K. Takahashi, S. N. Merchant, T. Miyazawa et al., "MELAS-da mitoxondrial DNT-nin müvəqqəti sümük histopatoloji və kəmiyyət analizi," Laringoskop, cild. 113, yox. 8, səh. 1362–1368, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  36. J. Schacht, A. E. Talaska və L. P. Rybak, "Cisplatin və aminoqlikozid antibiotikləri: eşitmə itkisi və onun qarşısının alınması", Anatomik qeyd, cild. 295, yox. 11, səh. 1837–1850, 2012. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  37. J. M. Lopez-Novoa, Y. Quiros, L. Visente, A. I. Morales və F. J. Lopez-Hernandez, "Aminoqlikozid nefrotoksiklik mexanizminə dair yeni anlayışlar: inteqrativ nöqteyi-nəzərdən", Böyrək Beynəlxalq, cild. 79, yox. 1, səh. 33–45, 2011. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  38. J. S. Duffield və J. V. Bonventre, "Böyrək boru epiteli işemik zədədən sonra təmir zamanı sümük iliyindən törəmə hüceyrələrlə əvəz edilmədən bərpa olunur," Böyrək Beynəlxalq, cild. 68, yox. 5, səh. 1956–1961, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  39. A. G. Cheng, L. L. Cunningham və E. W. Rubel, "Quşların basilar papillasında saç hüceyrələrinin ölümü: in vitro modelinin və kaspazın aktivləşdirilməsinin xarakteristikası," Otolarinqologiyada Tədqiqatlar Assosiasiyasının jurnalı, cild. 4, yox. 1, s. 91–105, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  40. H. C. Jensen-Smith, R. Hallworth və M. G. Nichols, "Gentamisin yüksək tezlikli koxlear xarici tük hüceyrələrində mitoxondrial metabolizmi sürətlə inhibə edir" PLoS BİR, cild. 7, yox. 6, Maddə ID-si e38471, 2012. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  41. T. R. van de Water, R. N. Abi-Hachem və A. Zine, "Yaralı koklea iltihab prosesləri, hüceyrə ölüm yollarının başlaması və əlaqəli otoprotektiv strategiyaların tətbiqi üçün hədəf kimi" CNS Dərman Kəşfinə dair Son Patentlər, cild. 5, yox. 2, s. 147–163, 2010. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  42. W. Marcotti, S. M. van Netten və C. J. Kros, "Aminoglikozid antibiotik dihidrostreptomisin, mexaniki-elektrik çevirici kanallar vasitəsilə siçanın xarici saç hüceyrələrinə sürətlə daxil olur." Fiziologiya jurnalı, cild. 567, yox. 2, s. 505–521, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  43. S. N. Hobbie, S. Akshay, S. K. Kalapala, C. M. Bruell, D. Shcherbakov və E. C. Böttger, “Eukaryotik rRNT ilə qarşılıqlı əlaqənin genetik analizi aminoqlikozidlərin ototoksikliyində hədəf olaraq mitoribosomu müəyyən edir,” Amerika Birləşmiş Ştatları Milli Elmlər Akademiyasının əsərləri, cild. 105, yox. 52, s. 20888–20893, 2008. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  44. N. Dehne, U. Rauen, H. de Groot və J. Lautermann, "Gentamisin ototoksisitesində mitokondrial keçiricilik keçidinin iştirakı" Eşitmə Araşdırması, cild. 169, yox. 1-2, s. 47-55, 2002. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  45. T. Tono, K. Kiyomizu, K. Matsuda et al., “1555 A→G mitoxondrial mutasiya ilə və onsuz aminoqlikozidlərin yaratdığı dərin karlığın müxtəlif klinik xüsusiyyətləri”, ORL, cild. 63, yox. 1, s. 25-30, 2001. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  46. E. C. Böttger, “Mutant A1555G mitoxondrial 12S rRNT və aminoqlikozidlərə həssaslıq,” Antimikrobiyal agentlər və kemoterapi, cild. 54, yox. 7, səh. 3073–3074, 2010. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  47. M. A. Dowlati, P. Derakhshandeh-Peykar, M. Houshmand et al., "Qeyri-sindromik və aminoqlikozidlərin yaratdığı eşitmə itkisi olan xəstələrdə mitoxondrial 12SrRNA geninin mutasiya analizində yeni nukleotid dəyişiklikləri," Molekulyar Biologiya Hesabatları, cild. 40, yox. 3, səh. 2689–2695, 2013. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  48. E. E. Vokes, "Baş və boyun xərçəngi üçün induksiya kemoterapi: son məlumatlar," Onkoloq, cild. 15, əlavə 3, səh. 3–7, 2010. Baxın: Google Scholar
  49. L. P. Rybak və V. Ramkumar, "Ototoksiklik", Böyrək Beynəlxalq, cild. 72, yox. 8, səh. 931–935, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  50. G. W. Hill, D. K. Morest və K. Parham, "Sisplatinin səbəb olduğu ototoksiklik: intratimpanik deksametazon inyeksiyalarının təsiri," Otologiya və Nevrotologiya, cild. 29, yox. 7, səh. 1005–1011, 2008. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  51. L. P. Rybak, C. A. Whitworth, D. Mukherjea və V. Ramkumar, "Sisplatinin səbəb olduğu ototoksikliyin və qarşısının alınması mexanizmləri", Eşitmə Araşdırması, cild. 226, yox. 1-2, səh. 157–167, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  52. T. Kimitsuki, T. Nakaqava, K. Hisashi, S. Komune və S. Komiyama, "Cisplatin cücə koxlear tük hüceyrələrində mexaniki-elektrik çevirici cərəyanını bloklayır," Eşitmə Araşdırması, cild. 71, yox. 1-2, səh. 64–68, 1993. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  53. W. J. Clerici, K. Hensley, D. L. DiMartino və D. A. Butterfield, "Koklear eksplantlarda ototoksikantlarla əlaqəli reaktiv oksigen növlərinin yaranmasının birbaşa aşkarlanması" Eşitmə Araşdırması, cild. 98, yox. 1-2, s. 116–124, 1996. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  54. J. R. Garc'xeda-Berrocal, J. Nevado, R. Ram'xedrez-Camacho et al., "Antixərçəng dərmanı sisplatin daxili qulaqda daxili apoptotik yola səbəb olur," İngilis Farmakologiya Jurnalı, cild. 152, yox. 7, səh. 1012–1020, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  55. S. A. Alam, K. Ikeda, T. Oshima və başqaları, "Monqol gerbil kokleasında sisplatin ilə əlaqəli apoptotik hüceyrə ölümü," Eşitmə Araşdırması, cild. 141, yox. 1-2, səh. 28–38, 2000. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  56. J. E. Li, T. Nakaqava, T. Kita və başqaları, “Siçan stria vascularisindəki marjinal hüceyrələrdə sisplatin tərəfindən törədilən apoptozun mexanizmləri,” ORL, cild. 66, yox. 3, səh. 111–118, 2004. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  57. J. E. Li, T. Nakaqava, T. S. Kim və başqaları, "Siçanların spiral qanqlionlarında apoptozun sürətli induksiyası üçün yeni bir model," Laringoskop, cild. 113, yox. 6, s. 994–999, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  58. M. Anniko və A. Sobin, "Cisplatin: onun ototoksik potensialının qiymətləndirilməsi", American Journal of Otolaryngology, cild. 7, yox. 4, səh. 276–293, 1986. Baxın: Google Scholar
  59. R. S. DeWoskin və J. E. Riviere, "Sisplatinin səbəb olduğu böyrək mis itkisi və nefrotoksiklik birdəfəlik dietilditiokarbamatla yaxşılaşdırılır, lakin mesna deyil," Toksikologiya və Tətbiqi Farmakologiya, cild. 112, yox. 2, səh. 182–189, 1992. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  60. H.-J. Kim, J.-H. Li, S.-J. Kim və s., "NADPH oksidazlarının sisplatinin səbəb olduğu reaktiv oksigen növlərinin yaranmasında və ototoksiklikdə rolları," Neuroscience jurnalı, cild. 30, yox. 11, səh. 3933–3946, 2010. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  61. B. Bánfi, B. Malgrange, J. Knisz, K. Steger, M. Dubois-Dauphin və K.-H. Krause, “NOX3, daxili qulağın superoksid yaradan NADPH oksidazı," Bioloji Kimya Jurnalı, cild. 279, yox. 44, səh. 46065–46072, 2004. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  62. K.-İ. Vatanabe, S. İnai, K. Jinnouchi, S.Baba və T. Yagi, “Cisplatin (CDDP) ilə müalicə olunan qvineya donuzlarının kokleasında kaspaza ilə aktivləşdirilmiş deoksiribonukleazın (CAD) və kaspaz 3 (CPP32) ifadəsi,” Auris Nasus qırtlaq, cild. 30, yox. 3, səh. 219–225, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  63. J. E. Li, T. Nakaqava, T. S. Kim və başqaları, "Sisplatin müalicəsindən sonra siçanların eşitmə sisteminin degenerasiyasında reaktiv radikalların rolu", Akta Oto-Laringologiya, cild. 124, yox. 10, səh. 1131–1135, 2004. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  64. T. C. Kelly, C. A. Whitworth, K. Husain və L. P. Rybak, "Aminoquanidin sisplatinin ototoksikliyini azaldır," Eşitmə Araşdırması, cild. 186, yox. 1-2, səh. 10-16, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  65. I. Nagy, A. Monge, A. Albinger-Hegyi, S. Schmid və D. Bodmer, “NF-κB in vitro yetkinləşməmiş eşitmə tük hüceyrələrinin yaşaması üçün tələb olunur. Otolarinqologiyada Tədqiqatlar Assosiasiyasının jurnalı, cild. 6, yox. 3, səh. 260–268, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  66. K. Vatanabe, S. Inai, K. Jinnouchi və başqaları, “Nüvə faktorlu kappa B (NF-kappa B) ilə induksiya olunan azot oksid sintaza (iNOS/NOS II) yolu sisplatinlə müalicə olunan siçanlarda stria vascularisə zərər verir,” Antixərçəng Araşdırması, cild. 22, yox. 6, səh. 4081–4085, 2002. Baxın: Google Scholar
  67. G. Li, W. Liu və D. Frenz, "Siçovulun daxili qulağına sisplatinin ototoksikliyi: HMG1 və iNOS üçün rol", Neyrotoksikologiya, cild. 27, yox. 1, səh. 22–30, 2006. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  68. M. A. Gratton və A. E. Vázquez, “Yaşla bağlı eşitmə itkisi: cari tədqiqat,” Otolarinqologiyada Mövcud Rəy & Baş və Boyun Cərrahiyyəsi, cild. 11, yox. 5, səh. 367–371, 2003. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  69. G. A. Qeyts və J. H. Mills, "Presbycusis", Lancet, cild. 366, yox. 9491, səh. 1111–1120, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  70. T. N. Roth, D. Hanebuth və R. Probst, "Avropada yaşa bağlı eşitmə itkisinin yayılması: bir baxış" Avropa Oto-Kərgədan-Laringologiya Arxivləri, cild. 268, yox. 8, səh. 1101–1107, 2011. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  71. B. Gopinath, E. Rochtchina, J. J. Wang, J. Schneider, S. R. Leeder və P. Mitchell, "Yaşlı yetkinlərdə yaşa bağlı eşitmə itkisinin yayılması: mavi dağlar araşdırması," Daxili xəstəliklər arxivi, cild. 169, yox. 4, səh. 415–416, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  72. B. Gopinath, J. Schneider, E. Rochtchina, S. R. Leeder və P. Mitchell, "Yaşlı əhalidə yaşa bağlı eşitmə itkisi və insult arasında əlaqə", Zərbə, cild. 40, yox. 4, səh. 1496–1498, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  73. A. W. Linnane, S. Marzuki, T. Ozawa və M. Tanaka, "Mitoxondrial DNT mutasiyaları yaşlanma və degenerativ xəstəliklərə mühüm töhfə verən kimi" Lancet, cild. 1, yox. 8639, səh. 642–645, 1989. Baxın: Google Scholar
  74. U. Bai, M. D. Seidman, R. Hinojosa və W. S. Quirk, “Yaşlanma ilə əlaqəli mitoxondrial DNT delesiyaları və ehtimal ki, presbikuzis: insan arxivinin temporal sümük tədqiqatı,” American Journal of Otology, cild. 18, yox. 4, səh. 449–453, 1997. Baxın: Google Scholar
  75. C. C. Kujoth, A. Hiona, T. D. Pugh və başqaları, "Tibb: məməlilərin yaşlanmasında mitoxondrial DNT mutasiyaları, oksidləşdirici stress və apoptoz", Elm, cild. 309, yox. 5733, səh. 481–484, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  76. B. K. Crawley və E. M. Keithley, "Mitoxondrial mutasiyaların yaşla eşitmə və koxlear patologiyaya təsiri", Eşitmə Araşdırması, cild. 280, yox. 1-2, səh. 201–208, 2011. Baxın: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  77. I. Darrat, N. Ahmad, K. Seidman və M. D. Seidman, "Antioksidanları əhatə edən eşitmə tədqiqatı," Otolarinqologiyada Mövcud Rəy & Baş və Boyun Cərrahiyyəsi, cild. 15, yox. 5, səh. 358–363, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  78. M. D. Seidman, "Pəhriz məhdudiyyətinin və antioksidantların presbiakuzaya təsiri" Laringoskop, cild. 110, yox. 5, hissə 1, səh. 727–738, 2000. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  79. A. Kashio, A. Amano, Y. Kondo et al., "C vitamini tükənməsinin SMP30/GNL nokaut siçanlarında yaşa bağlı eşitmə itkisinə təsiri," Biokimyəvi və Biofiziki Tədqiqat Əlaqələri, cild. 390, yox. 3, səh. 394–398, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  80. S. E. Heman-Ackah, S. K. Juhn, T. C. Huang və T. S. Wiedmann, "Birləşmiş antioksidant terapiya C57BL/6 siçanlarında yaşa bağlı eşitmə itkisinin qarşısını alır," Otorinolarinqologiya Baş Boyun Cərrahiyyəsi, cild. 143, yox. 3, səh. 429–434, 2010. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  81. S.-H. Sha, A. Kanicki, K. Halsey, K. A. Wearne və J. Schacht, "Antioksidantla zənginləşdirilmiş pəhriz yaşa bağlı eşitmə itkisinin inkişafını gecikdirmir" Yaşlanma Neyrobiologiyası, cild. 33, yox. 5, səh. e15–e16, 2012. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  82. T. Lindsten, A. J. Ross, A. King və başqaları, "Proapoptotik Bcl-2 ailə üzvləri Bak və Baxın birləşmiş funksiyaları çoxlu toxumaların normal inkişafı üçün vacibdir," Molekulyar hüceyrə, cild. 6, yox. 6, səh. 1389–1399, 2000. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  83. R. J. Youle və A. Strasser, "BCL-2 zülal ailəsi: hüceyrə ölümünə vasitəçilik edən fəaliyyətlərə qarşı" Təbiət Molekulyar Hüceyrə Biologiyasını nəzərdən keçirir, cild. 9, yox. 1, səh. 47–59, 2008. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  84. S. Someya, J. Xu, K. Kondo və başqaları, “C57BL/6J siçanlarında yaşa bağlı eşitmə itkisi Bakdan asılı mitoxondrial apoptozun vasitəçisidir” Amerika Birləşmiş Ştatları Milli Elmlər Akademiyasının əsərləri, cild. 106, yox. 46, səh. 19432–19437, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  85. D. I. Nelson, R. Y. Nelson, M. Concha-Barrientos və M. Fingerhut, “Peşə küyünün səbəb olduğu eşitmə itkisinin qlobal yükü”, American Journal of Industrial Medicine, cild. 48, yox. 6, səh. 446–458, 2005. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  86. N. Slepecky, "Daxili qulağın mexaniki zədələnməsinə ümumi baxış: səs-küy koxlear funksiyanı araşdırmaq üçün bir vasitə kimi" Eşitmə Araşdırması, cild. 22, yox. 1𠄳, səh. 307–321, 1986. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  87. B. H. Hu, D. Henderson və T. M. Nikotera, "Güclü səs-küyə məruz qalan şinşilla koklealarında apoptotik xarici saç hüceyrələrində F-aktinin parçalanması," Eşitmə Araşdırması, cild. 172, yox. 1-2, səh. 1-9, 2002. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  88. T. M. Nikotera, B. H. Hu və D. Henderson, "Şinşilla kokleasının səs-küydən qaynaqlanan apoptozunda kaspaz yolu", Otolarinqologiyada Tədqiqatlar Assosiasiyasının jurnalı, cild. 4, yox. 4, səh. 466–477, 2003. Baxın: Google Scholar
  89. B. H. Hu, Q. Cai, S. Manohar və başqaları, "Səs-küyə məruz qalmış siçovulların kokleasında apoptozla əlaqəli genlərin diferensial ifadəsi," Nevrologiya, cild. 161, yox. 3, səh. 915–925, 2009. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  90. M. A. Visente-Torres və J. Schacht, "Səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisi olan siçanların kokleasında mitoxondrial hüceyrə ölümü ilə pis əlaqə" Neuroscience Research jurnalı, cild. 83, yox. 8, səh. 1564–1572, 2006. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  91. K. K. Ohlemiller, J. S. Wright və L. L. Dugan, "Reaktiv səs-küyə məruz qaldıqdan sonra koxlear oksigen növlərinin erkən yüksəlişi," Audiologiya və Neyro-Otologiya, cild. 4, yox. 5, səh. 229–236, 1999. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  92. D. Yamashita, H.-Y. Jiang, J. Schacht və J. M. Miller, "Səs-küyə məruz qaldıqdan sonra sərbəst radikalların istehsalının gecikməsi," Beyin Araşdırması, cild. 1019, №. 1-2, səh. 201–209, 2004. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  93. D. Yamashita, J. M. Miller, H.-Y. Jiang, S. B. Minami və J. Schacht, "AİF və EndoG səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisi" NeuroReport, cild. 15, yox. 18, səh. 2719–2722, 2004. Baxın: Google Scholar
  94. J. Vanq, J. Ruel, S. Ladrech, C. Bonny, T. R. van de Water və J.-L. Puel, "C-Jun N-terminal kinaz vasitəçiliyi ilə mitoxondrial hüceyrə ölüm yolunun maneə törədilməsi səsə məruz qalan heyvanlarda eşitmə funksiyasını bərpa edir," Molekulyar Farmakologiya, cild. 71, yox. 3, səh. 654–666, 2007. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  95. Y. Y. C. Lo, J. M. S. Wong və T. F. Kruz, "Reaktiv oksigen növləri c-Jun NH2- terminal kinazaların sitokin aktivləşdirilməsinə vasitəçilik edir," Bioloji Kimya Jurnalı, cild. 271, yox. 26, səh. 15703–15707, 1996. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  96. A. Fridberger, A. Flock, M. Ulfendahl və B. Flock, “Akustik həddən artıq stimullaşdırma xarici saç hüceyrəsi Ca 2+ konsentrasiyasını artırır və eşitmə orqanının dinamik daralmasına səbəb olur,” Amerika Birləşmiş Ştatları Milli Elmlər Akademiyasının əsərləri, cild. 95, yox. 12, səh. 7127–7132, 1998. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  97. S. B. Minami, D. Yamashita, J. Schacht və J. M. Miller, "Kalsinevrin aktivləşməsi səs-küydən qaynaqlanan eşitmə itkisinə kömək edir," Neuroscience Research jurnalı, cild. 78, yox. 3, səh. 383–392, 2004. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  98. P. R. Thorne və A. L. Nuttall, "Qvineya donuzunda yüksək səsə məruz qalma zamanı koxlear qan axınının lazer doppler ölçüləri," Eşitmə Araşdırması, cild. 27, yox. 1, səh. 1–10, 1987. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  99. Y. Ohinata, J. M. Miller, R. A. Altschuler və J. Schacht, "Güclü səs-küy kokleada vazoaktiv lipid peroksidləşmə məhsullarının əmələ gəlməsinə səbəb olur," Beyin Araşdırması, cild. 878, yox. 1-2, səh. 163–173, 2000. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim
  100. J.-L. Puel, J. Ruel, C. Gervais D'Aldin və R. Pujol, "Eşitmə itkisi ilə əlaqəli səs-küy travmasından sonra koxlear sinapsların eksitotoksisitesi və təmiri," NeuroReport, cild. 9, yox. 9, səh. 2109–2114, 1998. Baxış: Nəşriyyat Saytı | Google Alim

Müəllif hüququ

Müəllif hüququ © 2015 Teru Kamogashira et al. Bu, Creative Commons Attribution License əsasında paylanmış açıq giriş məqaləsidir və orijinal əsərə düzgün istinad edildiyi təqdirdə istənilən mühitdə qeyri-məhdud istifadəyə, paylanmağa və təkrar istehsalına icazə verir.


Siçanlarda Lupusun Genetikası

Dwight H. Kono, Argyrios N. Theofilopoulos, Systemic Lupus Erythematosus (Beşinci Nəşr), 2011

Siçanlarda lupusun genetikasının tədqiqi

Siçanlarda lupus həssaslığını modullaşdıran genetik dəyişikliklər təkbaşına normal ştammlarda ağır lupusun inkişafına təkan verə bilənlərdən tutmuş xəstəliyin inkişafını tamamilə yatıran digərlərinə qədər, əksəriyyəti bu ifratlar arasında yaşayır. Bu cür genetik dəyişiklikləri müəyyən etmək üçün aparılan tədqiqatlarda həm irəli (fenotip→gen) həm də əks (gen→fenotip) yanaşmalardan istifadə edilmişdir. Yalnız onların xromosom yerləşməsinə əsaslanan genləri tapan irəli yanaşma həm kortəbii, həm də induksiya edilmiş modellərdə, o cümlədən adi, civə ilə induksiya olunan və ENU mutagenezindən qaynaqlanan meylli lokusları və genləri müəyyən etmək üçün istifadə edilmişdir. Normal və ya lupusa meylli suşlarda xüsusi gen mutasiyalarının lupusun inkişafına təsirini yoxlayan əks yanaşma, xəstəliyə meyllilik və/yaxud yatırtmaq potensialı olan genləri müəyyən etmək üçün istifadə edilmişdir.


Otoinflamatuar Xəstəliklər üzrə Yeniləmə: İltihablanmasomopatiyaları

Baxışın məqsədi: Otoinflamatuar xəstəliklər anormal fitri immun aktivasiya ilə idarə olunur. İnflamasomopatiyalar vəziyyətində bunların hamısı NLRP3 kimi fitri immun sensor tərəfindən nüvələşmiş iltihab kompleksinin aktivləşməsi ilə əlaqədardır. Bu araşdırma, iltihaba səbəb ola biləcək üç digər sensorun (NLRP1, NLRC4 və pirin) rolunu aydınlaşdırmağa kömək edən son nailiyyətlərə diqqət yetirəcəkdir.

Son tapıntılar: Pirindəki mutasiyalar (S242R və ya E244K) inhibitor 14-3-3 bağlanma yerini məhv edir və neytrofilik dermatoz (PAAND) ilə yeni xarakterizə edilən xəstəlik pirinlə əlaqəli autoinflamasiya ilə nəticələnir. Bundan əlavə, mevalonat kinaz çatışmazlığı ilə idarə olunan ayrı bir otoinflamatuar xəstəlik, qüsurlu RhoGTPase prenilasiyasına və sonradan pirin S242R fosforilasiyasının itirilməsinə gətirib çıxarır, bu da xəstəliyin ümumi mexanizmini göstərir. NLRP1 və NLRC4 kimi digər inflamasomlarda aktivləşmə və avtoinhibisiya üçün tələb olunan spesifik domenlər haqqında məlumat verən yeni mutasiyalar təsvir edilmişdir. Bu icmal yeni patogen mexanizmləri aydınlaşdıran gen kəşflərinə diqqət yetirərək, inflamasomopatiyaların öyrənilməsində son nailiyyətləri əhatə edir.

Açar sözlər: Otoinflamatuar xəstəlik IL-18 IL-1b İltihablı İltihabi İltihab.


P53 gen tənzimlənməsinin redoks təyini

Hədəf genlərinin promotorları daxilində p53 üçün bağlanma yerinin nukleotid ardıcıllığı stresə (UV işığı və ya γ-şüalanmaya məruz qalma) reaksiyada kritik determinantdır. DNT zədələnməsinə cavab olaraq, p53-ün hüceyrə dövranını tənzimləyən genin promotoru üçün bağlanma yaxınlığı səh21 WAF/CIP1 (səh21) dəyişməzdir, halbuki DNT təmiri ilə əlaqəli genin promotoruna bağlanır. Gadd45 azaldılır. Bu, ilk növbədə, p53 bağlayan konsensus pentamer A/TGPyPyPy-də üçüncü baza (birinci pirimidin qalığı) ilə təmasda olan insan p53-də yaşayan Cys277-nin oksidləşməsi ilə əlaqədardır: burada p21-in p53-məcburi elementi 5′-dir. GAACATGTCCcAACATGTTg-3′ və GADD45-inki 5′-GAACATGTCTAAGCATGCTg-3′-dür (və burada Cys277 ilə əlaqəni təyin edən kritik qalıqlar qırmızı rənglə göstərilmişdir və konsensusa uyğun əsaslar böyük hərflə göstərilmişdir). p53 Cys277 oksidləşməsinin mexanizmi aydın olmasa da, bu, yüksək dozalı UV işığına məruz qalmağa cavab olaraq induksiya edilən oksigen radikallarının istehsalı ilə əlaqəli ola bilər (Buzek və digərləri, 2002).

Yalnız azaldıcı şərtlərdə p53-ün yaxınlığı olur Gadd45 promotor artmışdır ki, bu da Cys277-nin azaldılmasının p53-ün C-lə zəngin bağlanma ardıcıllığına, məsələn Gadd45. Maraqlıdır ki, Seo et al. aşkar etdi ki, Cys275 və Cys277 qalıqlarının selenometionin (seleniumun əsas qida mənbəyi) tərəfindən azaldılması p53-ün p53-i bağlayan redoks faktoru Ref1-i işə salmasına və DNT-nin bərpası mexanizmini aktivləşdirməyə səbəb olub. Gadd45, hüceyrə böyüməsinə təsir etmədən (Seo et al., 2002). Beləliklə, p53 Cys277-nin redoks vəziyyəti DNT təmir mexanizmlərini aktivləşdirmək üçün bir keçid kimi görünür. p53-dən asılı DNT təmir fəaliyyətinin bu seçici aktivləşdirilməsi xərçəngin qarşısının alınması üçün yeni bir yanaşma kimi təklif edilmişdir (Gudkov, 2002).


Nöqtə mutasiyaları

Nöqtə mutasiyası - DNT ardıcıllığında tək bir azot əsasının dəyişməsi - adətən ən az zərərli DNT mutasiya növüdür. Kodonlar, transkripsiya zamanı messencer RNT tərəfindən "oxunan" üç azot əsasının ardıcıllığıdır. Bu xəbərçi RNT kodonu daha sonra orqanizm tərəfindən ifadə ediləcək bir zülal meydana gətirən bir amin turşusuna çevrilir. Kodonda azot əsasının yerləşməsindən asılı olaraq, nöqtə mutasiyasının zülala heç bir təsiri olmaya bilər.

Yalnız 20 amin turşusu və cəmi 64 mümkün kodon kombinasiyası olduğundan bəzi amin turşuları birdən çox kodonla kodlanır. Çox vaxt kodondakı üçüncü azot bazası dəyişdirilərsə, amin turşusu təsirlənməyəcəkdir. Buna dalğalanma effekti deyilir. Əgər nöqtə mutasiyası kodonda üçüncü azot bazasında baş verirsə, o zaman nə amin turşusuna, nə də sonrakı zülala təsir etmir və mutasiya orqanizmi dəyişmir.

Ən çox nöqtə mutasiyası zülaldakı tək bir amin turşusunun dəyişməsinə səbəb olur. Bu, adətən ölümcül mutasiya olmasa da, həmin zülalın qatlanma nümunəsi və zülalın üçüncü və dördüncü strukturları ilə bağlı problemlər yarada bilər.

Zərərsiz olmayan nöqtə mutasiyasına bir nümunə sağalmaz qan pozğunluğu oraq hüceyrəli anemiyadır. Bu, bir nöqtə mutasiyası zülalın qlutamik turşusunda bir amin turşusu üçün kodonda tək azot əsasının əvəzinə amin turşusu valini kodlamasına səbəb olduqda baş verir. Bu tək kiçik dəyişiklik normal yuvarlaq qırmızı qan hüceyrəsinin oraq şəklində olmasına səbəb olur.


Apoptoz

Apoptoz hüceyrə ölümünü nizamlı bir prosesdə proqramlaşdıran sistematik prosesdir. Hüceyrə istehsalı və hüceyrə itkisi arasında tarazlığın olmasını təmin etməkdə mühüm rol oynayır. Apoptoz zamanı xüsusi fermentlər - lizozimlər, hüceyrə komponentləri faqositlər tərəfindən udulan apoptotik cisimlərə (bleblərə) bağlanır. Apoptozda faqositlər tərəfindən istehsal olunan sitokinlər iltihabı azaldaraq ətrafdakı hüceyrələri qoruyur və orqanellər təkrar emal edilə bilər.

  • Tam inkişaf etməmiş hüceyrələr: məs. hüceyrələr inkişaf etməkdə olan bir embrionun beynindəki neyron şəbəkəsinə daxil edilmədikdə
  • Həddindən artıq hüceyrələr, hüceyrələri saxlamaq üçün enerji və resurslara xərclənir: məs. bəzi immun hüceyrələri tələb olunandan daha çox sayda istehsal olunur
  • Hüceyrələrə artıq ehtiyac yoxdur: məs. Hüceyrələr arasında olan rəqəmlər arasında toxuma meydana gətirən, infeksiya bitdikdən sonra immun hüceyrələr

İstinadlar

Meier, P., Finch, A. & Evan, G. İnkişafda apoptoz. Təbiət 407, 796–801 (2000).

Krammer, P. H. CD95-in immunitet sistemindəki ölümcül missiyası. Təbiət 407, 789–795 (2000).

Rich, T., Allen, R. L. & Wyllie, A. H. DNT zədələnməsindən sonra ölümə qarşı çıxmaq. Təbiət 407, 777–783 (2000).

Hengartner, M. O. Apoptozun biokimyası. Təbiət 407, 770–776 (2000).

Hacker, G. Apoptozun morfologiyası. Cell Tissue Res. 301, 5–17 (2000).

Adams, J. M. & amp Cory, S. Bcl-2 protein ailəsinin həyat və ya ölüm qərarları. Trendlər Biochem. Sci. 26, 61–66 (2001).

Deveraux, Q. L. və amp Reed, J. C. IAP ailə zülalları - apoptozun bastırıcıları. Genes Dev. 13, 239–252 (1999).

Jentsch, S. & amp Schlenker, S. Selektiv zülal deqradasiyası: proteazom daxilində səyahətin sonu. Hüceyrə 82, 881–884 (1995).

Pickart, C. M. Ubiquitination əsasında yatan mexanizmlər. Annu. Rev. Biochem. 70, 503–533 (2001).

Weissman, A.M. Mövzular və ubiquitylation haqqında varyasyonlar. Təbiət keşişi Mol. Hüceyrə Biol. 2, 169–178 (2001).

Schwartz, L. M., Myer, A., Kosz, L., Engelstein, M. & Maier, C. İnkişafla proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü zamanı poliubikitin gen ifadəsinin aktivləşdirilməsi. Neyron 5, 411–419 (1990).

Orlowski, R. Z. Apoptozda ubiquitin-proteazom yolunun rolu. Hüceyrə Ölümü Fərqlidir. 6, 303–313 (1999).

Wojcik, C. Apoptozda proteazomlar: canilər və ya qəyyumlar? Cell Mol. Həyat elmi. 56, 908–917 (1999).

Dawson, S. P. et al. Qarın interseqmental əzələlərində 26S proteazomunun inkişaf dəyişiklikləri Manduca sexta proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü zamanı. J. Biol. Kimya. 270, 1850–1858 (1995).

Jones, M. E., Haire, M. F., Kloetzel, P. M., Mykles, D. L. & Schwartz, L. M.Şahin güvesinin seqmentarası əzələlərində proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümü zamanı multikatalitik proteinazanın (proteazom) strukturunda və funksiyasında dəyişikliklər, Dev Biol 169, 436–447 (1995).

Duan, H. et al. SAG, hüceyrələri redoks agentləri tərəfindən törədilən apoptozdan qoruyan yeni sink RING barmaq zülalı. Mol. Hüceyrə Biol. 19, 3145–3155 (1999).

Lisztwan, J., Imbert, G., Wirbelauer, C., Gstaiger, M. & Krek, W. Von Hippel-Lindau şiş bastırıcı zülal E3 ubiquitin-protein liqaz fəaliyyətinin tərkib hissəsidir. Genes Dev. 13, 1822–1833 (1999).

Pause, A. et al. Von Hippel-Lindau şiş bastırıcı gen məhsulu Cdc53 zülal ailəsinin üzvü olan insan CUL-2 ilə sabit kompleks əmələ gətirir. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 94, 2156–2161 (1997).

Gorospe, M. et al. Von Hippel-Lindau zülalının böyrək karsinoma hüceyrələrində pozulmuş protein emalına qarşı qoruyucu funksiyası. Mol. Hüceyrə. Biol. 19, 1289–1300 (1999).

Schoenfeld, A. R. et al. Von Hippel-Lindau şiş bastırıcı geni hüceyrələri ultrabənövşəyi şüalar vasitəsilə apoptozdan qoruyur. Onkogen 19, 5851–5857 (2000).

Devarajan, P. et al. Von Hippel-Lindau gen məhsulu Bcl-2-dən asılı yollar vasitəsilə böyrək hüceyrələrinin apoptozunu maneə törədir. J. Biol. Kimya. 276, 40599–40605 (2001).

Raasi, S., Schmidtke, G. & amp Groettrup, M. Ubiquitin kimi zülal FAT10 kovalent konjugatlar əmələ gətirir və apoptoza səbəb olur. J. Biol. Kimya. 276, 35334–35343 (2001).

Takayama, S. et al. BAG-1-in klonlaşdırılması və funksional analizi: anti-hüceyrə ölümü fəaliyyəti ilə yeni bir Bcl-2 bağlayıcı zülal. Hüceyrə 80, 279–284 (1995).

Mikula, M. et al. C- olmayan siçanlarda embrional ölümcüllük və fetal qaraciyər apoptozuraf-1 gen. EMBO J. 20, 1952–1962 (2001).

Jesenberger, V. et al. Raf-1-in qoruyucu rolu Salmonella- makrofaqların apoptozu ilə induksiya olunur. J. Eks. Med. 193, 353–364 (2001).

Wang, H. G., Takayama, S., Rapp, U. R. & Reed, J. C. Bcl-2 qarşılıqlı zülal, BAG-1, Raf-1 kinazını bağlayır və aktivləşdirir. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 93, 7063–7068 (1996).

Matsuzawa, S., Takayama, S., Froesch, B. A., Zapata, J. M. & Reed, J. C. p53-induksiya olunan insan homoloqu Drosophila qiyabi yeddi (Siah) hüceyrə böyüməsini maneə törədir: BAG-1 ilə bastırma. EMBO J. 17, 2736–2747 (1998).

Thress, K., Henzel, W., Shillinglaw, W. & amp Kornbluth, S. Scythe: yeni biçin bağlayan apoptotik tənzimləyici. EMBO J. 17, 6135–6143 (1998).

Thress, K., Evans, E. K. & amp Kornbluth, S. Scythe-sequestered sitoxrom c-relizinq fəaliyyətinin Reaper səbəb olduğu dissosiasiyası. EMBO J. 18, 5486–5493 (1999).

Shinohara, K. et al. Proteazomun inhibisyonu nəticəsində apoptoz induksiyası. Biokimya. J. 317, 385–388 (1996).

Drexler, H. C. Proteazom funksiyasının inhibə edilməsi ilə hüceyrə ölüm proqramının aktivləşdirilməsi. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 94, 855–860 (1997).

Grimm, L. M., Goldberg, A. L., Poirier, G. G., Schwartz, L. M. & Osborne, B. A. Proteazomlar timosit apoptozunda mühüm rol oynayırlar. EMBO J. 15, 3835–3844 (1996).

Sadoul, R. et al. NGF-dən məhrum olan simpatik neyronların proqramlaşdırılmış hüceyrə ölümündə proteazomun iştirakı. EMBO J. 15, 3845–3852 (1996).

Grimm, L. M. və Osborne, B. A. Apoptoz və proteazom. Nəticələr Probl. Hüceyrə Fərqlidir. 23, 209–228 (1999).

Miyashita, T., Harigai, M., Hanada, M. & Reed, J. C. P53-dən asılı mənfi cavab elementinin müəyyən edilməsi Bcl-2 gen. Xərçəng Res. 54, 3131–3135 (1994).

Sadot, E., Geiger, B., Oren, M. & Ben-Ze'ev, A. Aktivləşdirilmiş p53 ilə β-Catenin-in aşağı tənzimlənməsi. Mol. Hüceyrə. Biol. 21, 6768–6781 (2001).

Amson, R. B. və başqaları. p53-induksiya etdiyi apoptozda 10 diferensial şəkildə ifadə olunan cDNA-nın təcrid edilməsi: onurğalı homoloqunun aktivləşdirilməsi. Drosophila yeddi qiyabi gen. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 93, 3953–3957 (1996).

Wu, G. S. və başqaları. KILLER/DR5 DNT zədələnməsi ilə induksiya olunan p53 ilə tənzimlənən ölüm reseptoru genidir. Təbiət Geneti. 17, 141–143 (1997).

Muller, M. et al. p53 aktivləşdirir CD95 (APO-1/Fas) antikanser dərmanlar tərəfindən DNT zədələnməsinə cavab olaraq gen. J. Eks. Med. 188, 2033–2045 (1998).

Stambolic, V. et al. Tənzimlənməsi PTEN p53 tərəfindən transkripsiya. Mol. Hüceyrə 8, 317–325 (2001).

Fortin, A. et al. APAF1 neyron hüceyrə ölümünün tənzimlənməsində p53 üçün əsas transkripsiya hədəfidir. J. Cell Biol. 155, 207–216 (2001).

Ryan, K. M., Phillips, A. C. & Vousden, K. H. P53 şiş bastırıcı proteinin tənzimlənməsi və funksiyası. Curr. Rəy. Hüceyrə Biol. 13, 332–337 (2001).İstinadlar 35–42 p53-ün transkripsiya hədəfləri kimi apoptozun əsas tənzimləyiciləri haqqında hesabat.

Marchenko, N. D., Zaika, A. & amp Moll, U. M. P53 zülalının mitoxondriyaya ölüm siqnalı ilə bağlı lokalizasiyası. Apoptotik siqnalda potensial rol. J. Biol. Kimya. 275, 16202–16212 (2000).

Bennett, M. et al. Fasın hüceyrə səthi ticarəti: p53 vasitəçiliyi ilə apoptozun sürətli mexanizmi. Elm 282, 290–293 (1998).

Fang, S., Jensen, J. P., Ludwig, R. L., Vousden, K. H. & Weissman, A. M. Mdm2 özü və p53 üçün RING barmağından asılı olan ubiquitin protein ligazıdır. J. Biol. Kimya. 275, 8945–8951 (2000).

Haupt, Y., Maya, R., Kazaz, A. & Oren, M. Mdm2 p53-ün sürətli deqradasiyasına kömək edir. Təbiət 387, 296–299 (1997).

Kubbutat, M. H., Jones, S. N. & Vousden, K. H. Mdm2 ilə p53 sabitliyinin tənzimlənməsi. Təbiət 387, 299–303 (1997).İstinadlar 46 47 p53 siqnalının effektiv dayandırılmasını təmin etmək üçün bir mexanizm kimi p53-ün Mdm2 tərəfindən təşviq edilən deqradasiyasını müəyyənləşdirin.

Boyd, S. D., Tsai, K. Y. & amp Jacks, T. p53-ün nüvə istisnası üçün bütöv bir HDM2 RING-barmaq domeni tələb olunur. Təbiət Hüceyrəsi Biol. 2, 563–568 (2000).

Geyer, R. K., Yu, Z. K. & Maki, C. G. MDM2 RING-barmaq domeni p53 nüvə ixracını təşviq etmək üçün tələb olunur. Təbiət Hüceyrəsi Biol. 2, 569–573 (2000).

Hsieh, J. K. və başqaları. RB MDM2 vasitəsilə p53-ün sabitliyini və apoptotik funksiyasını tənzimləyir. Mol. Hüceyrə 3, 181–193 (1999).

Sharp, D. A., Kratowicz, S. A., Sank, M. J. & amp George, D. L. Struktur olaraq əlaqəli MDMX zülalı ilə qarşılıqlı əlaqə ilə MDM2 onkoproteinin sabitləşməsi. J. Biol. Kimya. 274, 38189–38196 (1999).

Zhang, Y. & Xiong, Y. İnsanda mutasiyalar ARF ekson 2 onun nüvə lokalizasiyasını pozur və MDM2 və p53-ün nüvə ixracını əngəlləmək qabiliyyətini pozur. Mol. Hüceyrə 3, 579–591 (1999).

Fuchs, S. Y. və başqaları. JNK, stresssiz hüceyrələrdə p53 ubiquitination və deqradasiyanı hədəfləyir. Genes Dev. 12, 2658–2663 (1998).

Pagano, M. et al. Ubiquitin-proteasome yolunun siklindən asılı kinaz inhibitorunun bolluğunun tənzimlənməsində rolu p27. Elm 269, 682–685 (1995).

Vlach, J., Hennecke, S. & amp Amati, B. Siklindən asılı kinaz inhibitorunun fosforlaşmadan asılı deqradasiyası p27. EMBO J. 16, 5334–5344 (1997).

Nakayama, K. və başqaları. Skp2-nin məqsədyönlü şəkildə pozulması siklin E və p27(Kip1) toplanması, poliploidiya və sentrozomun çoxalması ilə nəticələnir. EMBO J. 19, 2069–2081 (2000).

Roy, N., Deveraux, Q. L., Takahashi, R., Salvesen, G. S. & Reed, J. C. c-IAP-1 və c-IAP-2 zülalları spesifik kaspazların birbaşa inhibitorlarıdır. EMBO J. 16, 6914–6925 (1997).

Deveraux, Q. L., Takahashi, R., Salvesen, G. S. & Reed, J. C. X ilə əlaqəli İAP hüceyrə ölümü proteazlarının birbaşa inhibitorudur. Təbiət 388, 300–304 (1997).Bu tədqiqat İAP-lərin kaspaz inhibitorları kimi funksiyasını açır.

Deveraux, Q. L. və başqaları. İAP-lar kaspaza-8 və sitoxromun yaratdığı apoptotik hadisələri bloklayır c fərqli kaspazların birbaşa inhibisyonu ilə. EMBO J. 17, 2215–2223 (1998).

Hauser, H. P., Bardroff, M., Pyrowolakis, G. & amp Jentsch, S. IAP apoptoz inhibitorları ilə əlaqəli nəhəng ubiquitin birləşdirici ferment. J. Cell Biol. 141, 1415–1422 (1998).BIR domeni ilə ubiquitin birləşdirici fermentin identifikasiyası.

Joazeiro, C. A. & amp Weissman, A. M. RING barmaq zülalları: ubiquitin ligase fəaliyyətinin vasitəçiləri. Hüceyrə 102, 549–552 (2000).

Yang, Y., Fang, S., Jensen, J. P., Weissman, A. M. & Ashwell, J. D. IAP-lərin Ubiquitin protein ligaz fəaliyyəti və apoptotik stimullara cavab olaraq proteazomlarda onların deqradasiyası. Elm 288, 874–877 (2000).Apoptotik proqramda əsas hadisə kimi IAP-lərin autoubiquityasiyası və deqradasiyası haqqında hesabat.

Huang, H. et al. Apoptozun inhibitoru, cIAP2, ubiquitin-protein ligaza kimi fəaliyyət göstərir və in vitro kaspaza 3 və 7-nin monoubikitinasiyası. J. Biol. Kimya. 275, 26661–26664 (2000).

Suzuki, Y., Nakabayashi, Y. & amp Takahashi, R. Apoptoz zülalının X ilə əlaqəli inhibitorunun Ubiquitin-protein ligaz fəaliyyəti kaspaza-3-ün proteazomal deqradasiyasına kömək edir və Fas-induksiya etdiyi hüceyrə ölümündə onun anti-apoptotik təsirini artırır. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 98, 8662–8667 (2001).IAP-nin canlı hüceyrələrdə aktiv kaspazın deqradasiyasına kömək edə biləcəyini sübut edən ilk araşdırma.

Karin, M. və Ben-Neriah, Y. Fosforlaşma ubiquitinasiyaya cavab verir: NF-κB fəaliyyətinə nəzarət. Annu. Rev. İmmunol. 18, 621–663 (2000).

Palombella, V. J., Rando, O. J., Goldberg, A. L. və Maniatis, T. Ubiquitin-proteasome yolu NF-κB1 prekursor zülalının işlənməsi və NF-κB-nin aktivləşdirilməsi üçün tələb olunur. Hüceyrə 78, 773–785 (1994).Bu hesabat NF-κB prekursorlarının aktiv zülallara tənzimlənən emalında ubiquitin/proteasome yolunun fəaliyyət göstərdiyini sübut edir.

Coux, O. & amp Goldberg, A. L. Nüvə amil κB1-in p105 prekursorunun ubiquitination və proteolitik emalını kataliz edən fermentlər. J. Biol. Kimya. 273, 8820–8828 (1998).

Hayashi, T. & amp Faustman, D. NF-κB aktivləşdirilməsində və şiş nekrozu faktoru-α ilə bağlı apoptozun qarşısının alınmasında insan lökosit antigeni ilə kodlanmış proteazom alt bölmələrinin əsas rolu. J. Biol. Kimya. 275, 5238–5247 (2000).

Deng, L. et al. IκB kinaz kompleksinin TRAF6 ilə aktivləşdirilməsi üçün dimerik ubiquitin-konjuqasiya edən ferment kompleksi və unikal poliubikitin zənciri tələb olunur. Hüceyrə 103, 351–361 (2000).IKK-nın Lys63 ilə əlaqəli multiubiquitin zəncirlərinin yığılması vasitəsilə aktivləşdirildiyini göstərməklə, bu iş NF-κB yolunun aktivləşdirilməsində ubiquitin üçün yeni tənzimləyici funksiyanı ortaya qoyur.

Wang, C. et al. TAK1 MKK və IKK-nın ubiquitindən asılı kinazıdır. Təbiət 412, 346–351 (2001).Bu tədqiqat kinazların ubiquitylation tərəfindən aktivləşdirilə biləcəyi tapıntısını genişləndirir.

Tanaka, M. və başqaları. IKK-β çatışmazlığı olan siçanlarda embrion öldürücülük, qaraciyər degenerasiyası və pozulmuş NF-κB aktivasiyası. İmmunitet 10, 421–429 (1999).

Wang, C. Y., Mayo, M. W., Korneluk, R. G., Goeddel, D. V. & Baldwin, A. S. Jr. NF-κB antiapoptoz: TRAF1 və TRAF2 və c-IAP1 və c-IAP2-nin induksiyası kaspaz-8 aktivləşməsini basdırmaq üçün. Elm 281, 1680–1683 (1998).

Wu, M. X., Ao, Z., Prasad, K. V., Wu, R. və Schlossman, S. F. IEX-1L, NF-κB vasitəçiliyi ilə hüceyrə sağ qalmasında iştirak edən apoptoz inhibitoru. Elm 281, 998–1001 (1998).

Zong, W. X., Edelstein, L. C., Chen, C., Bash, J. & Gelinas, C. Prosurvival Bcl-2 homoloqu Bfl-1/A1, TNFα ilə bağlı apoptozu bloklayan NF-κB-nin birbaşa transkripsiya hədəfidir. Genes Dev. 13, 382–387 (1999).

Kreuz, S., Siegmund, D., Scheurich, P. & Wajant, H. NF-κB induktorları ölüm reseptorunun siqnalının sikloheksimidlərə həssas inhibitoru olan cFLIP-i tənzimləyir. Mol. Hüceyrə. Biol. 21, 3964–3973 (2001).

Grossmann, M. et al. B-hüceyrəsinin yetişməsi zamanı tələb olunan Rel və RelA-nın antiapoptotik fəaliyyətləri Bcl-2 ifadə. EMBO J. 19, 6351–6360 (2000).İstinadlar 72–76 apoptozun əsas tənzimləyicilərini NF-κB transkripsiya fəaliyyətinin gen hədəfləri kimi müəyyənləşdirin.

Tang, G. et al. NF-κB hədəf genləri vasitəsilə JNK aktivasiyasının qarşısının alınması. Təbiət 414, 313–317 (2001).

De Smaele, E. et al. NF-κB tərəfindən Gadd45β induksiyası pro-apoptotik JNK siqnalını aşağı salır. Təbiət 414, 308–313 (2001).

Barkett, M. & amp Gilmore, T. D. Rel/NF-κB transkripsiya faktorları ilə apoptoza nəzarət. Onkogen 18, 6910–6924 (1999).

Connolly, J. L. et al. Reovirusun yaratdığı apoptoz NF-κB transkripsiya faktorunun aktivləşdirilməsini tələb edir. J. Virol. 74, 2981–2989 (2000).

Kasibhatla, S. et al. DNT-yə zərər verən agentlər NF-κB və AP-1-in aktivləşdirilməsi yolu ilə T limfositlərində Fas liqandının ifadəsini və sonrakı apoptozu induksiya edir. Mol. Hüceyrə 1, 543–551 (1998).

Rivera-Walsh, I., Waterfield, M., Xiao, G., Fong, A. & Sun, S. C. NF-κB siqnal yolunu idarə edir IZ gen ifadəsi və insan T-hüceyrə lösemi virusu-I vergi səbəbli T-hüceyrə ölümü. J. Biol. Kimya. 276, 40385–40388 (2001).

Dimmeler, S., Breitschopf, K., Haendeler, J. & amp Zeiher, A. M. Defosforilasiya ubiquitinə bağlı deqradasiya üçün Bcl-2-ni hədəfləyir: apoptosom və proteazom yolu arasında əlaqə. J. Eks. Med. 189, 1815–1822 (1999).

Breitschopf, K., Haendeler, J., Malchow, P., Zeiher, A. M. & amp Dimmeler, S. Bcl-2-nin posttranslational modifikasiyası onun proteazomdan asılı deqradasiyasını asanlaşdırır: cəlb olunan siqnal yolunun molekulyar xarakteristikası. Mol. Hüceyrə. Biol. 20, 1886–1896 (2000).

Marshansky, V. et al. Proteazomlar proapoptotik və antiapoptotik Bcl-2 ailə üzvləri arasında tarazlığı modulyasiya edir və leykemiya hüceyrələrində elektron daşıma zəncirinin fəaliyyətini pozur. J. İmmunol. 166, 3130–3142 (2001).

Breitschopf, K., Zeiher, A. M. & amp Dimmeler, S. Ubiquitin vasitəçiliyi ilə təklifin proapoptotik aktiv formasının deqradasiyası. Apoptoz induksiyasında funksional nəticə. J. Biol. Kimya. 275, 21648–21652 (2000).

Thomas, M. & Banks, L. HPV-18 E6 ilə Bak-induksiya etdiyi apoptozun qarşısının alınması. Onkogen 17, 2943–2954 (1998).

Li, B. & amp Dou, Q. P. Baxın ubiquitin / proteazomdan asılı yol ilə deqradasiyası: şişin sağ qalması və inkişafında iştirak. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 97, 3850–3855 (2000).

Peter, M. E., Heufelder, A. E. & amp Hengartner, M. O. Apoptoz tədqiqatında irəliləyişlər. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 94, 12736–12737 (1997).

Kitada, T. və başqaları. İçindəki mutasiyalar parkin gen autosomal resessiv gənc parkinsonizmə səbəb olur. Təbiət 392, 605–608 (1998).

Shimura, H. et al. Ailəvi Parkinson xəstəliyi gen məhsulu, parkin, ubiquitin-protein ligazasıdır. Təbiət Geneti. 25, 302–305 (2000).

Cummings, C. J. et al. E6-AP ubiquitin ligazın mutasiyası SCA1 siçanlarında poliqlutaminin səbəb olduğu patologiyanı sürətləndirərkən nüvə daxiletmə tezliyini azaldır. Neyron 24, 879–892 (1999).

Saigoh, K. et al. Ubiquitin karboksi-terminal hidrolazanı kodlayan gendə intragenik delesiya gad siçan. Təbiət Geneti. 23, 47–51 (1999).

Yuan, J. & amp Yankner, B. A. Sinir sistemində apoptoz. Təbiət 407, 802–809 (2000).

Huang, P. & amp Oliff, A. Xərçəng müalicəsi üçün potensial hədəflər kimi apoptozda siqnal yolları. Trendlər Cell Biol. 11, 343–348 (2001).

Baldwin, A. S. Jr. Seriyaya giriş: NF-κB transkripsiya faktoru və insan xəstəliyi. J. Clin. İnvestisiya edin. 107, 3–6 (2001).

Bondeson, J., Foxwell, B., Brennan, F. & amp Feldmann, M. Adenovirusdan istifadə edərək terapevtik hədəflərin müəyyən edilməsi: NF-κB-nin bloklanması romatoid sinoviumda həm iltihab, həm də dağıdıcı mexanizmləri inhibə edir, lakin antiinflamatuar mediatorları qoruyur. Proc. Natl Acad. Sci. ABŞ 96, 5668–5673 (1999).

Wang, C. Y., Cusack, J. C. Jr, Liu, R. & Baldwin, A. S. Jr. İnduksiya olunan kimyəvi müqavimətə nəzarət: NF-κB-nin inhibəsi ilə artan apoptoz vasitəsilə şiş əleyhinə terapiya. Təbiət Med. 5, 412–417 (1999).

Perkins, N. D. Rel/NF-κB ailəsi: dost və düşmən. Trendlər Biochem Sci. 25, 434–440 (2000).

Lee, D. H. və Goldberg, A. L. Proteazom inhibitorları: hüceyrə bioloqları üçün qiymətli yeni vasitələr. Trendlər Cell Biol. 8, 397–403 (1998).

Adams, J. et al. Proteazom inhibitorları: güclü və effektiv antitümör agentlərinin yeni sinfi. Xərçəng Res. 59, 2615–2622 (1999)

Mlynarczuk, I. et al. İnsan promonositik lösemik U937 hüceyrələrində TRAIL və proteazom inhibitorunun genişlənmiş proapoptotik təsirləri. Anticancer Res. 21, 1237–1240 (2001).

Milligan, S. A. və Nopajaroonsri, C. NF-κB-nin proteazom inhibitorları ilə inhibə edilməsi insan ağciyər adenokarsinoma hüceyrələrində apoptozu artırır in vitro. Anticancer Res. 21, 39–44 (2001).

Mitsiades, C. S. və başqaları. TRAIL/Apo2L liqand seçici olaraq apoptozu induksiya edir və çoxlu miyelomada dərman müqavimətini aradan qaldırır: terapevtik tətbiqlər. qan 98, 795–804 (2001).

Franco, A. V. et al. Melanoma hüceyrələrinin TNF ilə əlaqəli apoptoza səbəb olan liqandda (TRAIL) səbəb olduğu apoptozda NF-κB-nin rolu. J. İmmunol. 166, 5337–5345 (2001).

Şah, S. A. və başqaları. 26S proteazomunun inhibisyonu apoptoza səbəb olur və insan mədəaltı vəzi xərçənginin böyüməsini məhdudlaşdırır. J. Cell Biochem. 82, 110–122 (2001).

Cusack, J. C. Jr və başqaları. Proteazom inhibitoru PS-341 ilə CPT-11-ə yüksək kimyəvi həssaslıq: sistemli nüvə amili-κB inhibisyonu üçün təsirlər. Xərçəng Res. 61, 3535–3540 (2001).

Teicher, B. A., Ara, G., Herbst, R., Palombella, V. J. & amp Adams, J. Xərçəng müalicəsində proteazom inhibitoru PS-341. Clin. Xərçəng Res. 5, 2638–2645 (1999).

Cheng, E. H. et al. BCL-2, BCL-X(L) BAX və BAK vasitəçiliyi ilə mitokondrial apoptozun qarşısını alan yalnız BH3 domen molekullarını sekvestr edir. Mol. Hüceyrə 8, 705–711 (2001).

Koegl, M. et al. Yeni bir ubiquitination faktoru, E4, multiubiquitin zəncirinin yığılmasında iştirak edir. Hüceyrə 96, 635–644 (1999).


Giriş

Zülallar ən həyati hüceyrə funksiyalarımızı idarə edən molekulyar maşınlardır. Öz rolunu yerinə yetirmək üçün bir zülal əvvəlcə mürəkkəb üçüncü və bəzən dördüncü konformasiyaları qəbul edərək düzgün üçölçülü quruluşuna qatlanmalıdır. Qatlanmanın bir çox aspektləri zülalın özünün biofiziki xüsusiyyətlərinə xas olsa da, proses olduqca mürəkkəbdir və səhvlərə həssasdır (Dill və MacCallum, 2012). Zülallar son termodinamik cəhətdən sabit struktura çökən daxili qıvrımların mürəkkəb düzülüşündən ibarətdir və bir çox zülallar üçün yalnız cüzi bir sərbəst enerji qazancı (ümumiyyətlə yalnız -3 ilə -7 kkal/mol) olur (Lindquist və Kelly, 2011) saysız-hesabsız potensial səhv qatlanmış vəziyyətləri ilə müqayisədə zülalın düzgün qatlanması ilə bağlıdır. Beləliklə, sonuncuya bəzən üstünlük verilə bilər (baxın poster paneli 1). Bundan əlavə, xəstəlikdə iştirak edən bir çox səhv qatlanmış zülallar düzgün qatı sabitləşdirən və/və ya səhv qatlanmış vəziyyəti sabitləşdirən bir və ya bir neçə mutasiya ehtiva edir. In vivo, zülal qatlanması hüceyrənin sıx mühiti tərəfindən daha da çətinləşir, burada zülallar qonşu zülallarla yüksək enerjili toqquşmalarla daim bombardman edilərkən öz düzgün uyğunlaşmalarını qəbul etməlidirlər (Ellis və Minton, 2006). Bu fəsadlar, bir çox zülalın düzgün quruluşuna çatmaması və ya yanlış olanları sabit qəbul etməsi təəccüblü deyil. Bu ssenarilərin hər ikisi xəstəliklə nəticələnə bilər. Bundan əlavə, eukaryotik hüceyrələrdə zülal qatlanması bir neçə fərqli bölmədə baş verməlidir: mitoxondriya və peroksizomlar kimi kiçik, ixtisaslaşmış orqanellərdən əlavə, membran və ifraz olunan zülallar üçün endoplazmatik retikulumun (ER) kütləvi bölmələri var. sitozol və nüvə. Bu bölmələrin çox fərqli kimyəvi təbiəti, hər bir hüceyrənin qarşısını almalı və həll etməli olduğu fərqli protein qatlanması problemlərinə səbəb olur.

Hüceyrələrdə bu problemlərlə mübarizə aparmaq üçün bir çox üsul var. Birincisi, şaperonlar konstruktiv şəkildə ifadə edilir və açılmamış zülalların yığılmasına cavab olaraq daha da induksiya olunur. ER-də bu reaksiya nüvə və sitozolik bölmədə açılmamış zülal reaksiyası (UPR) kimi tanınır, istilik şok reaksiyası (HSR) kimi tanınır. (Digər orqanoidlər zəif xarakterizə edilən əlavə reaksiyalara malikdir.) Əvvəlcə qəfil stresslərə təcili reaksiyalar kimi xarakterizə edilən bu reaksiyaların daim zülal homeostazında kiçik pozğunluqlara cavab verdiyi və ilk mərhələdə zülalların qatlanmasına kömək etməkdə mühüm rol oynadığı aydındır. səhv qatlanmış zülalların düzgün uyğunlaşmalarını bərpa etmək üçün yerləşdirmək və ya onlara kömək etməkdir (Hartl et al., 2011-ci ildə nəzərdən keçirilir). İkincisi, səhv qatlanmış zülalın düzgün şəkildə yenidən qatlana bilməyəcəyi aydınlaşdıqda, proteazom, autofagiya və ER ilə əlaqəli deqradasiya (ERAD) kimi sistemlər bu səhv qatlanmış zülalları deqradasiya etmək üçün işə salınır (Nedelsky et al., 2008 Smith et al. al., 2011 Varshavsky, 2012). Bu yollardan hər hansı birinin disfunksiyası, təəccüblü deyil ki, zülalların yanlış qatlanması xəstəliyinə səbəb ola bilər. Ancaq bu heç də yeganə mexanizm deyil.

İlk məlum olan zülalın yanlış qatlanması xəstəliyi, əslində məlum molekulyar mexanizmə malik olan ilk irsi insan xəstəliyi oraq hüceyrəli anemiya idi.Bu pozğunluqda tək nöqtəli mutasiya hemoglobinin β-qlobulin zəncirindəki qlutamik turşusunu valine çevirir (Ingram, 1957 Hunt and Ingram, 1959). Toxuma kapilyar yataqlarının deoksigenləşdirilmiş mühitində (Gibson və Ellory, 2002) zülal mutasiya üçün homozigot olan fərdlərdə polimerləşməyə səbəb olan hidrofobik yamağı ifşa edərək konformasiyanı dəyişir. Bu, qırmızı qan hüceyrələrinin elastikliyini azaldır, həddindən artıq ağrıya, geniş toxuma məhvinə və anemiyaya səbəb olur. Allel Afrika populyasiyalarının böyük hissələrində yüksək səviyyədə saxlanılır, çünki heterozigot vəziyyətdə qırmızı qan hüceyrələrində təkrarlanan malyariya parazitinə qarşı müəyyən qorunma təmin edir (Aidoo et al., 2002). Bu vəziyyətdə, tək bir mutasiya birbaşa yaxşı başa düşülən bir xəstəliyə gətirib çıxarır (qüsursuz idarə olunsa da), lakin genetik dəyişikliklər, zülalların yanlış qatlanması və xəstəlik arasındakı əlaqə həmişə o qədər də sadə deyil.

Bu qısa “Bir Baxışda” əsərində biz zülalların səhv qatlanması və müdafiə homeostaz mexanizmləri zülal qatlanan yüklərlə ayaqlaşa bilmədiyi zaman nə baş verdiyini göstəririk ki, bu da insanda dağıdıcı xəstəliklərə gətirib çıxarır. Zülalların yanlış qatlanması indi yüzlərlə xəstəliyin inkişafı ilə əlaqədardır, həqiqətən də yoluxucu agentin səbəb olmadığı xəstəliklərin əksəriyyətində iştirak edir. Məqsədimiz müxtəlif əsas mexanizmləri olan seçilmiş bir sıra xəstəliklərdən istifadə edərək problemin genişliyini və müxtəlifliyini göstərməkdir. Təqdim etdiyimiz nümunələr arasında funksiya itkisi mutasiyaları (düzgün qatlama, deqradasiya və ya lokalizasiya səbəbindən) və funksiyaların artması mexanizmləri nəticəsində yaranan xəstəliklər (yeni toksik funksiyaya səbəb olan mutasiyalar, dominant-mənfi mutasiyalar və amiloid yığılması) daxildir. ). Hər il daha çox üzə çıxan zülalların yanlış qatlanan xəstəliklərinin bir çox başqa nümunələri var. Təəssüf ki, terapevtik müdaxilə, əksər hallarda, erkən mərhələdə qalır, lakin ümid üfüqdədir. Aşağıdakı nümunələr üçün qeyd edildiyi kimi, səhv qatlanmış zülalların xəstəliyə necə kömək etdiyini daha çox başa düşmək dərmanların kəşfi üçün yeni yollar açır.


Metodlar

Bitki materialı və böyümə şəraiti

BY-2 hüceyrə kulturaları [77] 25 °C-də (əgər başqa cür göstərilməyibsə), 120 rpm-də, qaranlıqda yetişdirildi. Hüceyrələr hər 7 gündən bir vitaminlərlə (M0222, Duchefa), 1,875 mM KH ilə əlavə edilmiş standart Murashige və Skoog (MS) mühitinə subkulturasiya edilmişdir.2PO4, 0,2 mg/L 2,4-D və 3% (ağırlıq/həc) saxaroza, pH 5,6-da.

Böyümək üçün Arabidopsis thaliana şitillər, Col-0 toxumları 0,05% (h/v) Tween 20 ilə 2,7 q/L natrium hipoxlorit məhlulu (Klorin, Colgate Palmolive) istifadə edərək 30 dəqiqə sterilizasiya edildi. Sonra toxumlar filtrlə sterilizə edilmiş Milli- ilə üç dəfə yuyuldu. Qatılaşdırılmış mühitə örtmədən əvvəl Q suyu. MS mühiti avtoklavlamadan əvvəl 1 M KOH ilə pH 5.8-ə gətirildi və tərkibində yarım güclü MS duzları və vitaminləri (M0222, Duchefa), 1% (ağırlıq/hacim) saxaroza, 10 mM MES və 0.8% (ağırlıq/həc) var idi. bitki agarı (P1001, Duchefa). Plitələr 22 °C/8 saat qaranlıqda 20 °C-də 150 ​​μE m - 2 s - 1 işıqda 16 saatlıq dövrlərlə şaquli olaraq inkubasiya edilmişdir.

Flüoresan sızması analizi (flüoroxromatik analiz)

Hüceyrələr mədəniyyət mühitində 10 dəqiqə otaq temperaturunda 4 μg/mL FDA ilə boyandı. Ləkələnmiş hüceyrə mədəniyyətinin yarım mililitr alikotları daha sonra hüceyrələrin mexaniki zədələnməsinin qarşısını almaq üçün kəsilmiş 1 ml ucdan istifadə edərək 2 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. Hər bir boru bioloji replika kimi qəbul edildi. Hər təcrübədə hər bir şərt üçün ən azı üç təkrar istifadə edilmişdir.

Borular dörd şəraitə məruz qaldı: (i) otaq temperaturunda skamyada (ii) 55 °C-də və ya (iii) 85 °C-də əvvəlcədən isidilmiş termoblokda 10 dəqiqə inkubasiya edildi (daha yaxşı istilik keçiriciliyi üçün quyular su ilə dolduruldu) (iv) maye azotda dondurulmuş snap. Müalicələrdən sonra mədəniyyətlər otaq temperaturunda 5 dəqiqə soyumağa və ya əriməyə buraxıldı və sonra ya konfokal lazer skan edən mikroskopiya (CLSM) istifadə edərək təsvir edilmək üçün nümunə şüşəsinə quraşdırıldı, ya da kəmiyyət təhlili üçün daha sonra emal edildi.

Kəmiyyətli flüoresein sızmasının təhlili üçün hüceyrələr 50 μm məsamələri olan neylon meshlərdə qranullandı. Supernatantlar tamamilə pipetlə toplandı, hər bir supernatantdan 150 μL 96 quyuluq düz dibli boşqabın (Sarstedt) boş quyularına köçürüldü. Daha sonra tor üzərindəki hüceyrələr 150 μL təzə BY-2 mühitindən istifadə edərək eyni boşqabın quyularına torlardan yuyuldu. Floresensiya FLUOstar Omega Microplate Reader cihazında (BMG LABTECH) 485 nm həyəcan/520 nm emissiya filtrlərindən (qazanma 800, 20 flaş/quyu) istifadə edərək ölçüldü. Vacib odur ki, nəzarət nümunələrində flüoreseinin hüceyrədənkənar boşluğa passiv diffuziyasının qarşısını almaq üçün müalicədən sonra 20 dəqiqə ərzində ölçmə aparılmalı idi. Sızan flüoresan intensivliyi hər bir nümunə üçün hüceyrələrdə və supernatantda aşkar edilmiş ümumi flüoresan intensivliyinin faizi kimi hesablanmışdır. Dunnet testi ilə birtərəfli ANOVA JMP 10 istifadə edərək həyata keçirildi və qrafik Origin2019-da quruldu.

Sytox Orange və FM4-64 boyanması

4-5 günlük BY-2 hüceyrə mədəniyyətinin alikotları 1 ml-lik kəsilmiş ucdan istifadə edərək 1,5 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. Hüceyrə mədəniyyətində Sytox Orange (SO) və FM4-64-ün son konsentrasiyası müvafiq olaraq 1 μM və 0.5 μM olmuşdur. Eksperimental dizayndan asılı olaraq hüceyrə mədəniyyətlərinə dörd müxtəlif rəngləmə protokolu tətbiq edildi: (i) Nəzarət olaraq, ləkələnmiş hüceyrə mədəniyyəti laboratoriya stendində 30 dəqiqə inkubasiya edildi. (ii) Ləkələnmiş hüceyrə mədəniyyəti 10 dəqiqəlik HS üçün əvvəlcədən isidilmiş termoblokda inkubasiya edilmişdir. (iii) Hüceyrə mədəniyyəti 10 dəqiqə ərzində HS-ə məruz qaldı və otaq temperaturunda əlavə 30 dəqiqədən sonra boyandı. (iv) Çoxgünlük (72 saat) təcrübələr üçün hüceyrə mədəniyyəti 10 dəqiqə ərzində HS-ə məruz qaldı və müşahidədən 10 dəqiqə əvvəl ləkələr tətbiq olundu. Hüceyrələr mikroskop slaydına quraşdırılmış və boyandıqdan sonra CLSM tərəfindən təsvir edilmişdir. Nəticələrin möhkəmliyini təmin etmək üçün hər bir müalicə üçün yüzdən çox hüceyrə sayıldı. Nəzərə alın ki, SO və FM4-64 ləkələrinin flüoresan emissiya profillərində müəyyən dərəcədə çarpışma var ki, bu da 85 °C HS-dən sonra ən çox nəzərə çarpır, lakin bu çarpışma təcrübələrimizin nəticələrinə heç bir təsir göstərmədi.

Nüvə fenotipləşməsi

HS-dən sonra nüvə fenotipini qiymətləndirmək üçün ikiqat 35S promotoru (2 × 35::Rluc-sGFP-NLS) altında NLS ilə birləşdirilən GFP-ni ifadə edən transgenik BY-2 xətti istifadə edilmişdir. Transgenik mədəniyyət [107]-yə uyğun olaraq yaradılmışdır. Müalicələrə aşağıdakılar daxildir: (i) HS yoxdur, (ii) 55 °C-də 10 dəqiqəlik nəbz HS, (iii) yuxarıda qeyd edildiyi kimi SO ilə boyanmaqla 55 °C-də 10 dəqiqəlik nəbz HS, aşağıdakı nəticələri təsdiqləmək üçün istifadə edilmişdir. HS (məlumatlar göstərilmir). HS-dən altı saat sonra, "Konfokal mikroskopiya" bölməsində təsvir olunduğu kimi, z-stack alınması Zeiss LSM 800 ilə çəkildi. Kəmiyyətin təyini maksimum intensivlik proqnozlarından istifadə etməklə aparılmışdır. Nüvələrin sahələri Fici proqramı (ImageJ versiyası 1.52r) ilə şəkillərin həddi seqmentləşdirilməsindən istifadə edərək təxmini hesablanmışdır. Üç müstəqil təcrübə aparıldı.

MitoTracker qırmızı ləkə

BY-2 hüceyrələri otaq temperaturunda 10 dəqiqə ərzində 100 μM MitoTracker Red (Thermo Fisher, M7512) ilə boyandı. Hüceyrələr mikroskop slaydına quraşdırılmış və "Konfokal mikroskopiya" bölməsində təsvir olunduğu kimi Zeiss LSM 780 istifadə edərək təsvir edilmişdir.

EGTA və siklosporin a müalicəsi

Yarım mililitr 4-5 günlük BY-2 hüceyrə kulturası 1,5 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. Hüceyrələr müalicədən 10 dəqiqə əvvəl MitoTracker Red (100 μM) və FDA (2 μg/mL) ilə boyandı. 55 °C-də 10 dəqiqəlik HS-dən əvvəl dörd müxtəlif müalicə (hamısı otaq temperaturunda) tətbiq edildi: (i) 10 mM EGTA, 10 dəqiqə üçün pH 8.0, (ii) 2 saat ərzində 0.1% DMSO, (iii) 15 μM 2 saat üçün CsA və (iv) 10 mM EGTA (HS-dən 10 dəqiqə əvvəl tətbiq olunur) və 15 μM CsA (HS-dən 2 saat əvvəl tətbiq olunur). Müalicə müddətləri ləngidi və HS-dən sonra 10 dəqiqə ərzində nümunələr skan edildi. Hüceyrələr mikroskop slaydına quraşdırılmış və Zeiss LSM 800 istifadə edərək təsvir edilmişdir.

EGTA müalicəsindən sonra hüceyrə ölüm nisbətini qiymətləndirmək üçün, müalicə olunan və sonra SO və FM4-64 ilə boyanmış BY-2 hüceyrələrindən istifadə edərək əlavə təcrübə aparıldı. Hər bir müalicə qrupu üçün üç bioloji təkrar var idi: (i) HS yoxdur, nəzarət (su), (ii) HS yoxdur, EGTA ilə, (iii) 10 dəqiqə 55 °C HS, nəzarət və (iv) 10 dəqiqə 55 °C HS, EGTA ilə. HS-dən sonra hər bir nümunənin 300 μL-i flüoresan mikroskopiya üçün nəzərdə tutulmuş 24 quyu boşqabına köçürüldü (μ-Plate 24, Ibidi 82406) və “Konfokal mikroskopiya” bölməsində təsvir olunduğu kimi Zeiss LSM 780 istifadə edərək təsviri çəkildi.

ATP məzmununun ölçülməsi

Təhlil əvvəllər dərc edilmiş protokol [108] əsasında aparılmışdır. 4 günlük BY-2 hüceyrə mədəniyyətinin yarım mililitr alikotları kəsilmiş uc ilə 2 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. Hər təcrübədə hər müalicə üçün altı təkrar ölçülmüşdür. Alikotlaşdırılmış hüceyrələr “Fluoressein sızması analizi (flüoroxromatik analiz)” bölməsində təsvir edilən müalicələrə məruz qalmışdır. Bundan əlavə, altı alikot 1 saat ərzində skamyada 48 μM CCCP ilə inkubasiya edilmişdir. Müalicədən sonra hüceyrələr 50 μm məsamələri olan neylon mesh üzərində qranullandı, 3 mL mühitlə yuyuldu və 600 μL qaynar tampon (100 mM Tris-HCl, 4 mM EDTA, pH 7.5, avtoklavlanmış) ilə yeni Eppendorf borularına yuyuldu. və fosfataz inhibitor kokteyli 2 (Sigma-Aldrich, P5726) ilə əlavə edilmişdir. Nümunələrin toplanması zamanı borular buz üzərində saxlanılmışdır. Sonra nümunələr 100 °C-də 10 dəqiqə qaynadıldı və zibil 4 °C-də 10.000-də büküldü.g 20 dəq. Supernatantlar yeni borulara köçürüldü və buz üzərində saxlanıldı.

Hər bir nümunə üçün 83,5 μL supernatant üç texniki təkrarda ağ Nunc plitələrinin quyularına köçürüldü. Fon siqnalı FLUOstar Omega Microplate Reader (BMG LABTECH) istifadə edərək, hər quyu üçün on ölçmə aparan linza filtri ilə aşkar edilib. 41,5 μL təzə hazırlanmış reaksiya tamponu (1,5 mM DTT, 100 μM Luciferin (Sigma L 6152) və 5 μg/mL Lusiferaza Phontius pyralis (Sigma L9506)) mikroplata oxuyucusunda avtomatlaşdırılmış nasos vasitəsilə hər bir quyuya pipetlə vuruldu. Reaksiya buferini əlavə etdikdən və reaksiya həcmində yaxşı qarışdırmağı təmin etmək üçün boşqab silkələdikdən sonra hər bir quyu üçün lüminesans aşkar edilmişdir. Standart əyri qurmaq və hər bir nümunədə ATP miqdarını hesablamaq üçün 1.8 10 − 2 M ilə 10 − 8 M arasında dəyişən ATP-nin ardıcıl seyreltilməsi istifadə edilmişdir. Dunnet testi ilə birtərəfli ANOVA JMP 10 istifadə edərək həyata keçirildi və qrafik Origin 2019-da quruldu.

CCCP müalicəsi

Yarım mililitr 4-5 günlük BY-2 hüceyrə mədəniyyəti 1 ml-lik kəsilmiş ucdan istifadə edərək 1,5 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. SO və FM4-64 ilə boyanma yuxarıda təsvir edildiyi kimi aparıldı (müvafiq olaraq HS və HS müalicə qrupları üçün i və ii protokolları). Dörd müalicə qrupuna aşağıdakılar daxildir: (i) otaq temperaturunda 48 μM CCCP ilə 10 dəqiqəlik müalicə, ardınca 10 dəqiqə ərzində 55 °C HS, (ii) otaq temperaturunda 10 dəqiqə ərzində 0,1% DMSO (avtomobil idarəsi) 10 dəqiqə ərzində 55° HS, (iii) 48 μM CCCP ilə 10 dəqiqəlik müalicə və HS yoxdur və (iv) HS olmadan 0,1% DMSO. Kulturalar flüoresan mikroskopiya üçün nəzərdə tutulmuş 24 quyuluq boşqaba köçürüldü (μ-Plate 24, Ibidi 82406). Quyuların skan edilməsi CLSM-dən istifadə etməklə avtomatik olaraq müalicədən 10 dəqiqə sonra və sonra 24 saat ərzində hər 2 saatdan bir həyata keçirilirdi. Hər müalicə qrupu üçün üç təkrarlama aparıldı.

Nəzarət (DMSO) və CCCP ilə müalicə olunan BY-2 hüceyrələrini müqayisə edən bir HS gradient təcrübəsi də aparıldı. Kulturalar yuxarıda təsvir edilən CCCP təcrübəsinə uyğun olaraq boyandı və müalicə olundu və sonra aşağıdakı şərtlərdən birinə məruz qaldı: (i) HS yoxdur, (ii) 40 °C, (iii) 45 °C, (iv) 50 °C və ya (v) 10 dəqiqə ərzində 55 °C HS. Mədəniyyətlər CLSM istifadə edərək 6 saat və 24 saat sonra skan edildi. Hər qrup üçün üç texniki təkrarlama aparıldı.

Osmotik stress analizi

Yarım mililitr 4-5 günlük BY-2 hüceyrə mədəniyyəti 1 ml-lik kəsilmiş ucdan istifadə edərək 1,5 ml-lik Eppendorf borularına köçürüldü. Hüceyrələr FDA ilə boyandı və “Fluoressein sızması analizi (fluoroxromatik analiz)”də təsvir edildiyi kimi HS-ə məruz qaldı. D-Mannitol əvvəlcədən ölçüldü və Eppendorf borularına əlavə edildi ki, 200 μL mədəniyyətin əlavə edilməsi 500 mM yekun konsentrasiyanı versin. HS-dən sonra mədəniyyətlərin 25 °C-də 10 dəqiqə soyumasına icazə verildi və sonra 200 μL D-Mannitol olan borulara köçürüldü. Kulturalar D-Mannitolu həll etmək üçün pipetləmə yolu ilə yumşaq bir şəkildə qarışdırıldı. D-Mannitol müalicəsinin 30 dəqiqəsi ərzində nümunələr nümunə şüşəsinə quraşdırılmış və Zeiss LSM 800 istifadə edərək təsvir edilmişdir.

Ferroptoz analizləri

Üç mililitr 4-5 günlük BY-2 hüceyrə mədəniyyəti 1 ml-lik kəsilmiş ucdan istifadə edərək 6 quyu boşqabına köçürüldü. Hüceyrə kulturalarına 16 saat ərzində beş müxtəlif müalicə tətbiq olundu və bu müddət ərzində onlar inkubatora qaytarıldı və yuxarıda göstərildiyi kimi yetişdirildi: (i) 0,1% DMSO (avtomobil idarəsi), (ii) 1 μM Fer-1 (Sigma SML0583) , (iii) 10 μM Fer-1, (iv) 50 μM Fer-1 və (v) 100 μM Fer-1. 16 saatlıq müalicədən sonra hər quyudan 0,5 mL mədəniyyət kəsilmiş 1 ml ucdan istifadə edərək 1,5 ml Eppendorf borularına köçürüldü və üç müalicəyə ayrıldı: (i) HS yoxdur, (ii) 10 dəqiqə ərzində 55 ° HS və ya (iii) yuxarıda göstərildiyi kimi 10 dəqiqə ərzində 85° HS. Müalicədən sonra 10 μL kultura flüoresan mikroskopiya üçün nəzərdə tutulmuş 24 quyulu lövhələrdə 490 μL təzə BY-2 mühitinə köçürüldü (μ-Lövhə 24, Ibidi 82406). SO və FM4-64 ilə boyanma yuxarıda təsvir edildiyi kimi aparıldı (müvafiq olaraq HS və HS müalicə qrupları üçün i və iii protokolları). Hər qrup üçün üç texniki təkrarlama aparıldı və quyular CLSM-dən istifadə etməklə aşağıdakı intervallarla avtomatik skan edildi: 10 dəq, 3, 6, 9, 12, 15, 18, 21 və 24 saat. Üç müstəqil təcrübə aparıldı.

Fer-1-in təsiri də sınaqdan keçirildi Arabidopsis thaliana əvvəllər ədəbiyyatda bildirilmiş protokoldan istifadə edərək fidanlar [89]. Arabidopsis şitilləri yuxarıda göstərildiyi kimi yetişdirildi və altı gündən sonra onlar 3 mL maye yarım güclü MS mühiti olan 6 quyu boşqablara yumşaq şəkildə köçürüldü və 16 saat ərzində aşağıdakı üç müalicədən biri verildi: (i) 0,1% DMSO (avtomobil üçün) nəzarət), (ii) 1 μM Fer-1 və (iii) 10 μM Fer-1. Köklərin bir gecədə yenidən böyümə kabinəsinə yerləşdirilməzdən əvvəl mayeyə batmasını təmin etmək üçün mühit fidanların üzərinə yumşaq bir şəkildə pipetlendi. Növbəti səhər şitillər aşağıdakı üç müalicədən birinə məruz qalmazdan əvvəl 6 quyu boşqablarından eyni emal mühitini ehtiva edən 1,5 ml-lik Eppendorf borularına diqqətlə köçürüldü: (i) HS yoxdur, (ii) 10 üçün 55° HS dəq və ya (iii) yuxarıda göstərildiyi kimi 10 dəqiqə ərzində 85° HS. Sonra şitillər yuxarıda təsvir edildiyi kimi SO və FM4-64 ilə boyandı (müvafiq olaraq HS və HS müalicə qrupları üçün protokollar i və iii) və HS-dən 3 saat və 6 saat sonra CLSM ilə skan edilənə qədər yenidən böyümə kabinetinə yerləşdirildi. Kökün erkən differensiasiya zonası hər zaman nöqtəsində üç fidan üçün skan edildi və üç müstəqil təcrübə aparıldı.

Konfokal mikroskopiya

Mikroqraflar GaAsP detektorları olan LSM 800 və ya LSM 780 konfokal lazer skan edən mikroskopdan (Carl Zeiss) istifadə etməklə əldə edilmişdir. Mikroqraflar dörd fərqli məqsədlə çəkilmişdir: × 10 (NA0.45), × 20 (NA0.8), × 40 (NA1.2, suya batırma) və × 63 (NA1.2, suya batırma). Şəkil 1a, b və əlavə video S1 üçün ardıcıl skan ilə z-stack alınması × 63 məqsədi ilə həyata keçirildi. BY-2 transgenik xəttindən istifadə edərək nüvə fenotiplənməsi (Şəkil 1c) × 20 obyektivindən istifadə edərək z-stack alınması ilə həyata keçirilmişdir. Flüoresan 488 nm-də həyəcanlandı və emissiya 499-dan 560 nm-ə qədər aşkar edildi. MitoTracker red 561 nm-də həyəcanlandı və emissiya 582-dən 754 nm-ə qədər aşkar edildi. SO 561 nm-də həyəcanlandı və emissiya 410-dan 605 nm-ə qədər aşkar edildi. FM4-64 həyəcanlandırması 506 nm, emissiya isə 650-dən 700 nm-ə qədər aşkar edilib. Şəkillər ZEN mavi proqramı (versiya 2.5, Carl Zeiss) və ya Zen qara (versiya 2.3) istifadə edilməklə əldə edilmişdir.


Videoya baxın: Гены, ДНК и хромосомы (Sentyabr 2022).


Şərhlər:

  1. Faerisar

    Razıyam, çox yaxşı şeydir

  2. Ragnar

    Bravo əla mesajdır)))

  3. Yozshutaxe

    Çox yaxşı ifadə

  4. Slaed

    Absurd bir vəziyyət ortaya çıxdı

  5. Bidziil

    Well done, this sentence was just about

  6. Aescby

    Demək istədiyiniz deməkdir.

  7. Rayford

    tez cavab)))

  8. Prescot

    Yes, you rightly said



Mesaj yazmaq